【摘 要】
：
目的:探讨苦参碱对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞A549的放疗敏感性的影响及其可能机制.方法:采用不同浓度(0、1、2、3、4 g/L)苦参碱处理A549细胞48 h,MTT法检测其增殖活性并计算半数抑制浓度(IC50)和20％IC50;根据实验目的将A549细胞分为空白对照组、苦参碱(1.22 g/L)组、放疗(4 Gy X射线照射处理)组、联合组(1.22 g/L苦参碱处理48 h后,再进行4 Gy X射线照射处理).采用MTT法检测各组细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;克隆形成实验检测细胞放射
【机 构】
：
南华大学附属南华医院肿瘤内科,湖南 衡阳421002;南华大学附属南华医院肝胆外科,湖南 衡阳421002
论文部分内容阅读
目的:探讨苦参碱对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞A549的放疗敏感性的影响及其可能机制.方法:采用不同浓度(0、1、2、3、4 g/L)苦参碱处理A549细胞48 h,MTT法检测其增殖活性并计算半数抑制浓度(IC50)和20％IC50;根据实验目的将A549细胞分为空白对照组、苦参碱(1.22 g/L)组、放疗(4 Gy X射线照射处理)组、联合组(1.22 g/L苦参碱处理48 h后,再进行4 Gy X射线照射处理).采用MTT法检测各组细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;克隆形成实验检测细胞放射敏感性,并绘制剂量?细胞存活曲线;采用2?脱氧葡萄糖类似物(2?NBDG)法检测细胞葡萄糖摄取率;比色法检测细胞乳酸产量、己糖激酶(HK)以及丙酮酸激酶(PK)的活性;Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved?Caspase?3、Bax、Bcl?2,通路蛋白p?mTOR、mTOR及糖酵解相关蛋白己糖激酶2(HK2)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)蛋白的表达水平.结果:苦参碱呈剂量依赖性抑制A549细胞增殖活性(P<0.05),作用48 h的IC50为(2.69±0.11)g/L,选择20％IC50值1.22 g/L作为苦参碱后续作用剂量.苦参碱联合放疗处理后A549细胞的拟合存活曲线较单独放疗处理左移,放射增敏比为1.324.与苦参碱或单独放疗处理组比较,苦参碱联合放疗处理可显著降低A549细胞增殖活性(P<0.05),升高细胞凋亡率(P<0.05),降低A549细胞葡萄糖摄取率、乳酸产量及PK活性(P<0.05),并能显著上调cleaved?Caspase?3、Bax蛋白表达水平(P<0.05),下调Bcl?2和PKM2蛋白表达及p?mTOR水平(P0.05).结论:苦参碱能升高A549细胞的放疗敏感性,其机制可能与抑制mTOR信号通路介导的糖酵解作用有关.
其他文献
目的:研究藏药喜玛拉雅紫茉莉的化学成分.方法:综合运用正相硅胶色谱、反向ODS柱色谱等分离技术,对喜马拉雅紫茉莉甲醇提取物的化学成分进行提取、分离;通过理化性质和波谱数据对分离得到的化合物进行结构鉴定.结果:从喜马拉雅紫茉莉的甲醇提取物中分离得到6个化合物,分别鉴定为:二十三烷酸(1)、Mirabija-lone A(2)、Boeravinone C(3)、Mirabijalone H(4)、Mirabijalone I(5)、Abronione(6).结论:其中,化合物4、5为新化合物,化合物1、2、4
目的:建立同时测定枳壳与麸炒枳壳中8个成分含量及UPLC特征图谱方法,为枳壳与麸炒枳壳的质量研究提供依据.方法:采用Agilent SB C18(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱;以乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为0.4 mL/min;柱温30℃;检测波长320 nm;进样量为2μL;对24批枳壳及其炮制品特征图谱与8个指标成分进行同时测定,并运用相关软件进行分析.结果:枳壳及麸炒枳壳UPLC特征图谱确定11个共有峰,聚类分析和主成分分析可将24个样品按生品与炮制品聚为2类
目的:建立胃脘舒颗粒的HPLC指纹图谱,并测定其中6种成分的含量,为其质量控制提供参考.方法:采用SPEYY C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.05％乙酸溶液,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为280 nm;柱温为25℃;进样量为15μL;建立10批胃脘舒颗粒的指纹图谱,归属共有峰,并进行含量测定.结果:建立的指纹图谱共归属了16个共有峰,指认出6个成分.10批胃脘舒颗粒指纹图谱与对照图谱之间的相似度为0.959～0.999,绿原酸、芍药苷、延胡索乙素、橙