目的:建立一种检测大鼠血浆中阿法替尼浓度的UPLC-MS/MS方法。方法:选择用乙腈沉淀的蛋白质样品进行样品处理并运用Waters XEVO TQD三重四级杆液质联用仪和CORTECS BEH C18柱（50 mm×2.1 mm,1.6μm）分离分析物。流动相由乙腈和水（0.1%甲酸）组成,流速为0.4 ml·min^-1,柱温为40℃,内标为来那替尼。采用正离子电喷雾多反应监测（MRM）模式对分析物进行定量,目标碎片离子为阿法替尼m/z 486.19→112.1,来那替尼（IS）m/z 557.3→112.15。结果:阿法替尼在1-200 ng·ml^-1范围内线性关系良好（r=0.998 1）,定量下限为1 ng·ml^-1。日内精密度和日间精密度均≤9.51%,阿法替尼从血浆中回收率高于77.1%。大鼠灌胃给药和静脉给药阿法替尼后,t_1/2分别为7.19 h和2.69 h,C_max分别为97.78 ng·ml^-1和123.37 ng·ml^-1,AUC_（0-∞）分别为1 505.4 ng·h·ml^-1和405.55 ng·h·ml^-1。结论:该方法准确可靠,操作简便,重复性好,适用于灌胃和静脉注射10和2 mg·kg^-1剂量的阿法替尼的药动学研究。