【摘 要】
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目的 探讨疏肝健脾活血方防治肝纤维化的可能作用机制。方法 48只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、疏肝健脾活血方组、CUGBP1敲减组，每组12只。CUGBP1敲减组一次性尾静脉注射CUGBP1敲减腺相关病毒，其余各组尾静脉注射对照腺相关病毒，每只小鼠注射量为100μl，病毒滴度不少于1×1012vg/ml。4周后，除正常组外，其余各组小鼠腹腔注射20%四氯化碳（CCl4） 2.5 m
【基金项目】
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国家自然科学基金（81973736）；
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目的 探讨疏肝健脾活血方防治肝纤维化的可能作用机制。方法 48只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、疏肝健脾活血方组、CUGBP1敲减组，每组12只。CUGBP1敲减组一次性尾静脉注射CUGBP1敲减腺相关病毒，其余各组尾静脉注射对照腺相关病毒，每只小鼠注射量为100μl，病毒滴度不少于1×1012vg/ml。4周后，除正常组外，其余各组小鼠腹腔注射20%四氯化碳（CCl4） 2.5 ml/kg，每3天注射1次，连续4周，诱导肝纤维化模型；同时疏肝健脾活血方组小鼠予33.3 g/（kg·d）疏肝健脾活血方药液灌胃，正常组、模型组及CUGBP1敲减组予10 ml/kg蒸馏水灌胃，每天1次，连续4周。末次给药12 h后取材，采用HE染色、Masson染色、天狼星红染色进行肝脏病理学观察；检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平及肝组织中羟脯氨酸（HYP）含量；检测肝组织中Ⅰ型胶原（CollagenⅠ）、α平滑肌激动蛋白（α-SMA）、磷酸化Smad2 （p-Smad2）、磷酸化Smad3 （p-Smad3）、Smad7、CUG结合蛋白1（CUGBP1）蛋白表达，肝组织中转化生长因子β1 （TGF-β1）、CollagenⅠ、α-SMA、Smad7、CUGBP1 mRNA表达。结果 与正常组比较，模型组小鼠肝组织病理显示肝细胞排列紊乱，有大量炎性细胞浸润与大量胶原纤维沉积，并且形成明显的纤维间隔；血清中ALT、AST水平及肝组织中HYP含量上升，肝组织中CollagenⅠ、CUGBP1、p-Smad2、p-Smad3、α-SMA蛋白表达升高，TGF-β1、CollagenⅠ、CUGBP1、α-SMA mRNA表达升高，Smad7蛋白及mRNA表达下降（P＜0.05或P＜0.01）。与模型组比较，疏肝健脾活血方组和CUGBP1敲减组小鼠肝组织病理显示有少量炎性细胞浸润，纤维组织增生不明显，纤维间隔稀疏；血清中ALT、AST水平及肝组织中HYP含量下降，上述蛋白及mRNA水平均有所改善（P＜0.05或P＜0.01）。与疏肝健脾活血方组比较，除Smad7 mRNA表达升高外，CUGBP1敲减组其余各指标差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论疏肝健脾活血方可能通过抑制肝组织CUGBP1表达，从而阻断TGF-β1/Smads信号后续转导，进而抑制肝纤维化进展。
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