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目的：提高毕赤酵母工程菌P.pastoris-CBHⅡ液体发酵产纤维二糖水解酶（CBHⅡ）的能力。方法：分别构建了用于胞外及胞内表达透明颤菌血红蛋白（VHb）基因的毕赤酵母重组表达质粒pPICZαA-vhb与pPICZαA（-s）-vhb。通过电转化将两种质粒转化巴氏毕赤酵母重组菌体P.pastoris-CBHⅡ菌株,经过筛选分别获得可正确表达具有生物活性的VHb蛋白的重组菌株P.pastoris-CBHⅡ-vhb（胞内表达VHb）及P.pastoris-CBHⅡ-vhb（-s）（胞外表达VHb）。结果：