在体内转染和检测经携带DNA微泡转染的干细胞基因表达

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摘要目的探讨(a)携带DNA的微泡(MB)能否在体转染干细胞;(b)转染的细胞是否具有活力并表达基因;(c)基因表达在体内能否足以被检测。材料与方法本研究经动物伦理委员会批准。准备荧光素酶绿色荧光蛋白(GFP)质粒标记的阳离子MB,标记经SYBR Gold染色法(Life Technologies,Carlsbad,Calif)确认。携带DNA的MB转染C17.2细胞。2×105个细胞悬浮在20μL磷酸盐缓冲液中,然后加入200μL Abstract AIM To investigate whether (a) DNA-carrying microvesicles (MB) can transfect stem cells in vivo; (b) whether transfected cells are viable and express genes; and (c) whether gene expression is sufficiently detectable in the body. Materials and Methods The study was approved by Animal Ethics Committee. The labeled MB of luciferase green fluorescent protein (GFP) plasmid was prepared and the labeling was confirmed by SYBR Gold staining (Life Technologies, Carlsbad, Calif). DNA-carrying MBs were transfected into C17.2 cells. 2 × 10 5 cells were suspended in 20 μL phosphate buffer and then 200 μL was added
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