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摘要 针对三唑酮与黄芪多糖、丁子香酚、醇提肉豆蔻和醇提蛇床子进行不同比例混配，采用不同浓度级对烤烟白粉病菌进行孢子萌发抑制研究。结果表明：三唑酮∶黄芪多糖=9∶1浓度级为31.04 mg/L时，其孢子萌发率为4.53%；三唑酮∶丁子香酚=7∶3浓度级为15.30 mg/L时，其孢子萌发率为5.77%；三唑酮∶醇提肉豆蔻=7∶3浓度级为200.00 mg/L时，其孢子萌发率为12.19%；三唑酮∶醇提蛇床子=7∶3浓度级为200.00 mg/L时，其孢子萌发率为6.95%。室内毒力测定，三唑酮∶醇提肉豆蔻=7∶3时相关系数达0.9924，三唑酮∶丁子香酚=5∶5時相关系数达0.986 5，三唑酮∶醇提蛇床子=7∶3时相关系数达0.986 3。
关键词 混配试剂；烤烟；白粉病菌；毒力测定
中图分类号 S435.72 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）23-0111-03
白粉病作为烤烟主要病害之一，造成大量烟叶损失，病情严重直接导致绝收。目前，防治白粉病通常采用化学农药，但其残留量会影响烟叶品质和安全质量[1-2]。三唑酮属于低毒性杀菌剂，但仍然会出现农残超标现象[3]。为此，本研究在不同浓度级的条件下，针对三唑酮与生物农药进行混配，探寻最佳配比及浓度对烤烟白粉病菌的抑制效果，以期为大田防治白粉病提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试药剂。15%三唑酮可湿性粉剂（四川迪美生物科技有限公司），0.5%黄芪多糖水剂（潍坊奥丰作物病毒防治有限公司），0.3%丁子香酚可溶性液剂（保定市亚达化工有限公司），醇提肉豆蔻，醇提蛇床子。
1.1.2 供试病菌。烤烟白粉病菌（Erysiphe cichoracearum DC.），采自贵阳主产烟区感染白粉病的烟株，接种保存于贵州大学植物病理教研室恒温培养箱中。
1.1.3 材料及用具。水琼脂培养基（20 g琼脂粉、1 000 mL水）、60 mm培养皿、无菌水、无菌操作台、分析天平、药管、离心机、高压灭菌锅、摇床、移液枪。
1.2 试验方法
毒力测定采用孢子萌发法，参照中华人民共和国农业行业标准《混配的联合作用》（NY/T 1156.6-2006）进行测定。将三唑酮与所用药剂按质量比9∶1、7∶3、5∶5进行混配，设置5个浓度，求出各混配组合的EC50值，各药剂的具体配比见表1。
2 结果与分析
2.1 不同三唑酮混配制剂对孢子萌发的影响效果
2.1.1 三唑酮与黄芪多糖不同配比对孢子萌发的影响。从表2可知，三唑酮与黄芪多糖按照9∶1、7∶3和5∶5进行混配，在5个不同质量浓度条件下，孢子萌发总数随着浓度增加而减少。通过同级浓度效果比较，9∶1的混配效果最优，7∶3和5∶5的混配效果在不同浓度级差异不明显。经校正处理后，9∶1混配在31.040 0 mg/L浓度级效果最佳，萌发率仅为4.53%；其次为5∶5混配31.040 0 mg/L浓度级，萌发率为 7.87%；效果最差的为5∶5混配1.940 0 mg/L浓度级，萌发率为 45.06%。
2.1.2 三唑酮与丁子香酚不同配比对孢子萌发的影响。从表3可知，三唑酮与丁子香酚按照9∶1、7∶3和5∶5进行混配，在5个不同质量浓度条件下，孢子萌发总数仍随浓度增加而减少。同级浓度效果比较，7∶3的混配效果最优，9∶1和5∶5的混配效果在不同浓度级交错体现优势。经校正处理后，7∶3混配在15.300 8 mg/L浓度级效果最佳，萌发率仅为5.77%；其次为9∶1混配15.300 0 mg/L浓度级，萌发率为7.05%；效果最差的为5∶5混配1.910 0 mg/L浓度级，萌发率高达56.39%。
2.1.3 三唑酮与醇提肉豆蔻不同配比对孢子萌发的影响。从表4可知，三唑酮与醇提肉豆蔻按照9∶1、7∶3和5∶5混配，在5个不同质量浓度条件下，孢子萌发总数仍随浓度增加而减少。同级浓度效果比较，7∶3的混配效果最优，5∶5与 9∶1同级浓度效果差异不明显。经校正处理后，7∶3混配在 200.000 0 mg/L浓度级效果最佳，萌发率仅为12.19%；其次为9∶1和5∶5混配200.000 0 mg/L浓度级，萌发率均为19.46%；效果最差的为9∶1混配12.500 0 mg/L浓度级，萌发率达75.26%。
2.1.4 三唑醇与醇提蛇床子不同配比对孢子萌发的影响。从表5可知，三唑酮与醇提蛇床子按照9∶1、7∶3和5∶5进行混配，在5个不同质量浓度条件下，孢子萌发总数仍随浓度增加而减少。同级浓度效果比较，7∶3的混配效果最优，其次为9∶1混配效果，最差的为5∶5混配处理。经校正处理后，7∶3混配在200.000 0 mg/L浓度级效果最佳，萌发率仅为6.95%；其次为9∶1混配200.000 0 mg/L浓度级，萌发率为7.93%；效果最差的为5∶5混配12.500 0 mg/L浓度级，萌发率达到61.71%。
2.2 不同三唑酮混配制剂对烤烟白粉菌的毒力作用
从表6可知，各处理的相关系数均除三唑酮∶丁子香酚=7∶3组合外均达到了0.9以上，各药剂浓度与孢子萌发情况呈现较好的线性关系。药剂效果按EC50从小到大的顺序排列为三唑酮∶丁子香酚=7∶3、三唑酮∶丁子香酚=9∶1、三唑酮∶黄芪多糖=9∶1、三唑酮∶黄芪多糖=7∶3、三唑酮∶黄芪多糖=5∶5、三唑酮∶丁子香酚=5∶5、三唑酮∶醇提蛇床子=9∶1、三唑酮∶醇提肉豆蔻=7∶3、三唑酮∶醇提蛇床子=7∶3、三唑酮∶醇提蛇床子=5∶5、三唑酮∶醇提肉豆蔻=9∶1、三唑酮∶醇提肉豆蔻=5∶5，EC50值分别为0.69、0.74、0.89、1.43、1.49、2.30、19.97、20.21、21.18、25.68、41.53、43.54 mg/L。
三唑酮与不同提取物的混配对烤烟白粉菌均有抑制效果。三唑酮∶醇提肉豆蔻=7∶3时，其关联性最佳，相关系数达0.992 4；其次是三唑酮∶丁子香酚=5∶5时，相关系数达0.986 5；三是三唑酮∶醇提蛇床子=7∶3時，相关系数达0.986 3；最差的为三唑酮∶丁子香酚=7∶3时，相关系数为0.872 2。
3 结论与讨论
研究结果表明，不同混配试剂对烤烟白粉病菌有不同效果的抑制作用。三唑酮∶醇提肉豆蔻=7∶3混配浓度级为200.0 mg/L时，其孢子萌发抑制率高达87.81%，毒力相关系数高达0.992 4；其次为三唑酮∶丁子香酚=5∶5混配30.56 mg/L时，其孢子萌发抑制率为83.08%，毒力相关系数达到0.986 5；最差的为三唑酮∶丁子香酚=7∶3浓度级为0.96 mg/L时，其孢子萌发抑制率紧为54.95%，相关系数为0.872 2。相关系数越高其对烤烟白粉病菌的抑制效果越好[4]。
从本试验结果分析，混配试剂防治烤烟白粉病菌，仅凭室内测定毒力效果不能完全证明对病菌的抑制作用，还必须通过田间活体烟株进行防治效果的验证[5-6]。本次试验筛选的结果对于防治烤烟白粉病菌提供了理论依据，为以后进一步筛选中草药防治白粉病提供了依据。
4 参考文献
[1] 宋双，张鑫，罗晶，等.不同杀菌剂对烟草白粉病菌的室内毒力及田间防效[J].西北农林科技大学学报，2014，41（2）：131-135.
[2] 何海永，陈小均，杨学辉，等.4种杀菌剂防治烟草白粉病的效果[J].农技服务，2008，25（10）：73.
[3] 李永育，张秀衡，林彩萍，等.白粉病防治药剂对比试验[J].海峡科学，2009（12）：69-70.
[4] 郭齐汤，陈巧红，陈文乐.几种药剂对烟草白粉病田间防效初探[J].江西农业学报，2009，21（12）：120-121
[5] 刘晓波.烟草白粉病田间防效的试验研究[J].农业技术与设备，2013，254：42-43.
[6] 范成平，胡宁贵，陈恩发，等.贵州安顺地区烟草白粉病菌侵染特性及发生分析[J].安徽农业科学，2015，43（25）：102-105.
关键词 混配试剂；烤烟；白粉病菌；毒力测定
中图分类号 S435.72 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）23-0111-03
白粉病作为烤烟主要病害之一，造成大量烟叶损失，病情严重直接导致绝收。目前，防治白粉病通常采用化学农药，但其残留量会影响烟叶品质和安全质量[1-2]。三唑酮属于低毒性杀菌剂，但仍然会出现农残超标现象[3]。为此，本研究在不同浓度级的条件下，针对三唑酮与生物农药进行混配，探寻最佳配比及浓度对烤烟白粉病菌的抑制效果，以期为大田防治白粉病提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试药剂。15%三唑酮可湿性粉剂（四川迪美生物科技有限公司），0.5%黄芪多糖水剂（潍坊奥丰作物病毒防治有限公司），0.3%丁子香酚可溶性液剂（保定市亚达化工有限公司），醇提肉豆蔻，醇提蛇床子。
1.1.2 供试病菌。烤烟白粉病菌（Erysiphe cichoracearum DC.），采自贵阳主产烟区感染白粉病的烟株，接种保存于贵州大学植物病理教研室恒温培养箱中。
1.1.3 材料及用具。水琼脂培养基（20 g琼脂粉、1 000 mL水）、60 mm培养皿、无菌水、无菌操作台、分析天平、药管、离心机、高压灭菌锅、摇床、移液枪。
1.2 试验方法
毒力测定采用孢子萌发法，参照中华人民共和国农业行业标准《混配的联合作用》（NY/T 1156.6-2006）进行测定。将三唑酮与所用药剂按质量比9∶1、7∶3、5∶5进行混配，设置5个浓度，求出各混配组合的EC50值，各药剂的具体配比见表1。
2 结果与分析
2.1 不同三唑酮混配制剂对孢子萌发的影响效果
2.1.1 三唑酮与黄芪多糖不同配比对孢子萌发的影响。从表2可知，三唑酮与黄芪多糖按照9∶1、7∶3和5∶5进行混配，在5个不同质量浓度条件下，孢子萌发总数随着浓度增加而减少。通过同级浓度效果比较，9∶1的混配效果最优，7∶3和5∶5的混配效果在不同浓度级差异不明显。经校正处理后，9∶1混配在31.040 0 mg/L浓度级效果最佳，萌发率仅为4.53%；其次为5∶5混配31.040 0 mg/L浓度级，萌发率为 7.87%；效果最差的为5∶5混配1.940 0 mg/L浓度级，萌发率为 45.06%。
2.1.2 三唑酮与丁子香酚不同配比对孢子萌发的影响。从表3可知，三唑酮与丁子香酚按照9∶1、7∶3和5∶5进行混配，在5个不同质量浓度条件下，孢子萌发总数仍随浓度增加而减少。同级浓度效果比较，7∶3的混配效果最优，9∶1和5∶5的混配效果在不同浓度级交错体现优势。经校正处理后，7∶3混配在15.300 8 mg/L浓度级效果最佳，萌发率仅为5.77%；其次为9∶1混配15.300 0 mg/L浓度级，萌发率为7.05%；效果最差的为5∶5混配1.910 0 mg/L浓度级，萌发率高达56.39%。
2.1.3 三唑酮与醇提肉豆蔻不同配比对孢子萌发的影响。从表4可知，三唑酮与醇提肉豆蔻按照9∶1、7∶3和5∶5混配，在5个不同质量浓度条件下，孢子萌发总数仍随浓度增加而减少。同级浓度效果比较，7∶3的混配效果最优，5∶5与 9∶1同级浓度效果差异不明显。经校正处理后，7∶3混配在 200.000 0 mg/L浓度级效果最佳，萌发率仅为12.19%；其次为9∶1和5∶5混配200.000 0 mg/L浓度级，萌发率均为19.46%；效果最差的为9∶1混配12.500 0 mg/L浓度级，萌发率达75.26%。
2.1.4 三唑醇与醇提蛇床子不同配比对孢子萌发的影响。从表5可知，三唑酮与醇提蛇床子按照9∶1、7∶3和5∶5进行混配，在5个不同质量浓度条件下，孢子萌发总数仍随浓度增加而减少。同级浓度效果比较，7∶3的混配效果最优，其次为9∶1混配效果，最差的为5∶5混配处理。经校正处理后，7∶3混配在200.000 0 mg/L浓度级效果最佳，萌发率仅为6.95%；其次为9∶1混配200.000 0 mg/L浓度级，萌发率为7.93%；效果最差的为5∶5混配12.500 0 mg/L浓度级，萌发率达到61.71%。
2.2 不同三唑酮混配制剂对烤烟白粉菌的毒力作用
从表6可知，各处理的相关系数均除三唑酮∶丁子香酚=7∶3组合外均达到了0.9以上，各药剂浓度与孢子萌发情况呈现较好的线性关系。药剂效果按EC50从小到大的顺序排列为三唑酮∶丁子香酚=7∶3、三唑酮∶丁子香酚=9∶1、三唑酮∶黄芪多糖=9∶1、三唑酮∶黄芪多糖=7∶3、三唑酮∶黄芪多糖=5∶5、三唑酮∶丁子香酚=5∶5、三唑酮∶醇提蛇床子=9∶1、三唑酮∶醇提肉豆蔻=7∶3、三唑酮∶醇提蛇床子=7∶3、三唑酮∶醇提蛇床子=5∶5、三唑酮∶醇提肉豆蔻=9∶1、三唑酮∶醇提肉豆蔻=5∶5，EC50值分别为0.69、0.74、0.89、1.43、1.49、2.30、19.97、20.21、21.18、25.68、41.53、43.54 mg/L。
三唑酮与不同提取物的混配对烤烟白粉菌均有抑制效果。三唑酮∶醇提肉豆蔻=7∶3时，其关联性最佳，相关系数达0.992 4；其次是三唑酮∶丁子香酚=5∶5时，相关系数达0.986 5；三是三唑酮∶醇提蛇床子=7∶3時，相关系数达0.986 3；最差的为三唑酮∶丁子香酚=7∶3时，相关系数为0.872 2。
3 结论与讨论
研究结果表明，不同混配试剂对烤烟白粉病菌有不同效果的抑制作用。三唑酮∶醇提肉豆蔻=7∶3混配浓度级为200.0 mg/L时，其孢子萌发抑制率高达87.81%，毒力相关系数高达0.992 4；其次为三唑酮∶丁子香酚=5∶5混配30.56 mg/L时，其孢子萌发抑制率为83.08%，毒力相关系数达到0.986 5；最差的为三唑酮∶丁子香酚=7∶3浓度级为0.96 mg/L时，其孢子萌发抑制率紧为54.95%，相关系数为0.872 2。相关系数越高其对烤烟白粉病菌的抑制效果越好[4]。
从本试验结果分析，混配试剂防治烤烟白粉病菌，仅凭室内测定毒力效果不能完全证明对病菌的抑制作用，还必须通过田间活体烟株进行防治效果的验证[5-6]。本次试验筛选的结果对于防治烤烟白粉病菌提供了理论依据，为以后进一步筛选中草药防治白粉病提供了依据。
4 参考文献
[1] 宋双，张鑫，罗晶，等.不同杀菌剂对烟草白粉病菌的室内毒力及田间防效[J].西北农林科技大学学报，2014，41（2）：131-135.
[2] 何海永，陈小均，杨学辉，等.4种杀菌剂防治烟草白粉病的效果[J].农技服务，2008，25（10）：73.
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[4] 郭齐汤，陈巧红，陈文乐.几种药剂对烟草白粉病田间防效初探[J].江西农业学报，2009，21（12）：120-121
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[6] 范成平，胡宁贵，陈恩发，等.贵州安顺地区烟草白粉病菌侵染特性及发生分析[J].安徽农业科学，2015，43（25）：102-105.