【摘 要】
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背景:前期研究发现,补肾调肝方治疗骨关节炎有明显临床疗效,但缺乏对其作用机制的研究.目的:观察补肾调肝方含药血清对大鼠软骨细胞自噬的影响,并探讨其内在机制.方法:传代培养的第3代大鼠软骨细胞随机分为4组:二甲基亚砜组、10μg/L白细胞介素1β组、10μg/L白细胞介素1β+10％补肾调肝方含药血清组和雷帕霉素5μmol/L组,分别处理软骨细胞24 h.单丹磺酰尸胺染色法检测软骨细胞自噬小体表达;实时荧光定量PCR检测自噬相关基因ATG5、ATG7 mRNA的表达;Western blot检测Beclin
【机 构】
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广州中医药大学第三附属医院,广东省广州市 510240;深圳市罗湖区中医院,广东省深圳市 518000
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背景:前期研究发现,补肾调肝方治疗骨关节炎有明显临床疗效,但缺乏对其作用机制的研究.目的:观察补肾调肝方含药血清对大鼠软骨细胞自噬的影响,并探讨其内在机制.方法:传代培养的第3代大鼠软骨细胞随机分为4组:二甲基亚砜组、10μg/L白细胞介素1β组、10μg/L白细胞介素1β+10％补肾调肝方含药血清组和雷帕霉素5μmol/L组,分别处理软骨细胞24 h.单丹磺酰尸胺染色法检测软骨细胞自噬小体表达;实时荧光定量PCR检测自噬相关基因ATG5、ATG7 mRNA的表达;Western blot检测Beclin1、LC3A/B和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的蛋白表达水平.结果 与结论:①与二甲基亚砜组比较,10μg/L白细胞介素1β组中细胞的自噬小体数量明显减少;雷帕霉素处理后的软骨细胞与二甲基亚砜组相比,自噬小体的数量明显增多;与10μg/L白细胞介素1β组相比,10μg/L白细胞介素1β+10％补肾调肝方含药血清组的自噬小体明显增多;②实时荧光定量PCR及Western blot结果显示,与二甲基亚砜组比较,10μg/L白细胞介素1β组中软骨细胞自噬相关基因ATG5、ATG7 mRNA及Beclin1和LC3A/B-Ⅱ/LC3A/B-Ⅰ蛋白表达水平均明显下降(P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.05),而p-AKT和p-mTOR蛋白表达水平明显上升(P<0.05,P<0.05);与二甲基亚砜组相比,雷帕霉素处理后的软骨细胞中ATG5、ATG7 mRNA及Beclin1和LC3A/B-Ⅱ/LC3A/B-Ⅰ蛋白表达水平均明显上升(P<0.01,P<0.05,P<0.05,P<0.05),而p-AKT和p-mTOR蛋白表达水平明显下降(P<0.01,P<0.01);与10μg/L白细胞介素1β组相比,10μg/L白细胞介素1β+10％补肾调肝方含药血清组中软骨细胞自噬相关基因ATG5、ATG7 mRNA及Beclin1和LC3A/B-Ⅱ/LC3A/B-Ⅰ的蛋白表达水平均明显上升(P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.01),而p-AKT和p-mTOR蛋白表达水平明显下降(P<0.05,P<0.05);③提示补肾调肝方含药血清可能通过抑制软骨细胞内AKT/mTOR信号通路增加软骨细胞的自噬能力,延缓关节软骨退变,起到治疗骨关节炎的作用.
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背景:浓缩生长因子与表皮生长因子是近年来被广泛研究的生物学材料,经研究证实其可通过影响细胞生物学行为,进而促进组织修复与损伤愈合.目的:探讨浓缩生长因子联合表皮生长因子对人牙龈成纤维细胞、上皮细胞、人正常黑色素细胞系正常人皮肤黑色素细胞增殖和衰老的影响.方法:①浓缩生长因子/表皮生长因子与人牙龈成纤维细胞、上皮细胞、正常人皮肤黑色素细胞体外共培养,MTT分别筛选出浓缩生长因子、表皮生长因子、浓缩生长因子+表皮生长因子的最佳作用浓度;②实验分组:人牙龈成纤维细胞对照组、50％浓缩生长因子组、10μg/L表皮
背景:研究表明咪喹莫特对病理性瘢痕具有一定的防治作用,但其作用靶点及确切机制尚未明确.目的:探索咪喹莫特作用于病理性瘢痕的靶点基因并进行验证,观察咪喹莫特对瘢痕成纤维细胞迁移能力的影响.方法:从GEO在线数据库中下载并分析数据集,整合筛选出咪喹莫特作用于瘢痕组织的靶点基因.提取瘢痕来源的成纤维细胞,采用划痕实验及Transwell实验检测咪喹莫特对细胞迁移能力的影响,免疫印迹法检测Ⅰ型胶原及作用靶点PCOLCE的蛋白表达水平.结果 与结论:①通过筛选数据集整合结果,获得2个作用靶点基因,分别为PCOLCE
背景:绝经后冠心病妇女血清雌二醇降低与心功能减退、心室重构加重有关,绝经对慢性心力衰竭病情的影响及机制尚不十分清楚.沉默信息调节因子1在心血管系统中发挥保护作用.目的:研究沉默信息调节因子1在卵巢切除加重小鼠慢性心力衰竭中的作用及机制.方法:选择野生型雌性C57BL/6J小鼠及沉默信息调节因子1基因敲除的雌性C57BL/6J小鼠进行实验.①将野生型小鼠随机分为:假手术组、主动脉缩窄组、卵巢切除+主动脉缩窄组、卵巢切除+主动脉缩窄+雌二醇组.术后第1天开始,卵巢切除+主动脉缩窄+雌二醇组大鼠按照0.2 mg
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背景:骨移植是临床中骨缺损治疗的主要方法,由于自体移植及异体移植的限制,组织工程骨作为替代品变得尤为重要.理想的组织工程骨需具有良好的生物学特性,这取决于支架材料的微观结构及化学性质等因素.目的:骨组织工程支架的不同设计如何影响支架的骨传导性、骨诱导性及生物降解性3种生物学特性.方法:以“骨组织工程、骨传导性、骨诱导性、黏附、扩散、物理特性、化学特性、结构特性、生长因子、离子、生物降解性、聚合物、无机材料、金属”为中文检索词检索中国知网数据库;以“bone tissue engineering,osteo
背景:在最佳功率负荷下进行力量训练能实现骨骼肌输出功率的最大化,骨骼肌输出功率的增大能提高运动员的运动表现和大众的健康水平,备受国内外学者和体能教练的青睐.目的:确定不同力量训练手段最佳功率负荷,分析不同力量训练手段最佳功率负荷输出功率特征.方法:选择北京体育大学男性大学生运动员27名,进行半蹲起和卧推抛最大力量测试,利用九轴传感器测试受试者在10％,30％,50％,70％和90％最大力量负荷下的输出功率.结果 与结论:①半蹲起的最佳功率负荷为70％最大力量,其平均输出功率和最大输出功率均显著高于10％,
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