RT-PCR法测定脂肪组织解偶联蛋白mRNA表达水平的探讨

来源 :广西医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zxqzxm88
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目的:建立解偶联蛋白(UCP) mRNA表达水平的竞争性RT-PCR测定法;并应用该方法测定UCP mRNA在成人腹膜内与腹膜外脂肪组织的表达水平.方法:应用剪接重叠延伸PCR (SOE-PCR)合成中央缺失型UCP竞争者RNA.UCP mRNA 与作为内设标准的UCP竞争者RNA用相同的引物在同一反应体系中进行逆转录反应和PCR扩增.通过比较UCP mRNA产物和UCP竞争者RNA产物的放射性信号强度求取UCP mRNA表达水平.结果:腹膜内与腹膜外脂肪组织样品中均检测到UCP mRNA;UCP mRNA表达水平腹膜内脂肪组织为(6.853±4.207)amol/fmol β-actin,腹膜外脂肪组织为(0.521±0.497)amol/fmol β-actin(()±s)(P
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