【摘 要】
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目的 研究血塞通对脂多糖(LPS)诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及机制.方法 将H9 c2细胞分为对照组、模型组和低、高剂量实验组.对照组细胞正常培养不做任何处理;模型组用1
【机 构】
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菏泽市立医院,山东 菏泽274000
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目的 研究血塞通对脂多糖(LPS)诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及机制.方法 将H9 c2细胞分为对照组、模型组和低、高剂量实验组.对照组细胞正常培养不做任何处理;模型组用10μg·mL-1 LPS处理12 h;低、高剂量实验组分别用0.20,0.40 mg·mL-1血塞通预处理细胞12 h,再用10μg·mL-1 LPS处理12 h.以细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测各组细胞存活率;以流式细胞术测定细胞凋亡水平;以荧光探针DCFH-DA检测活性氧(ROS)水平;以酶联免疫吸附法检测细胞炎症因子水平;以蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞凋亡核因子抑制蛋白(IκBα)、磷酸化p65(p-p65)、p65蛋白表达水平.结果 对照组、模型组和低、高剂量实验组的细胞存活率分别为(100.00±2.15)％,(33.93±5.17)％,(47.02±6.41)％和(52.49±7.17)％,凋亡率分别为(2.76±0.40)％,(74.40±6.54)％,(54.22±6.74)％和(47.39±6.55)％;模型组与对照组和低、高剂量实验组比较,高、低剂量实验组组间,差异均有统计学意义(均P<0.05).对照组、模型组和低、高剂量实验组的细胞炎性因子NF-кB分别为(0.72±0.07),(1.27±0.15),(1.05±0.12),(0.88±0.09)μmol·L-1,IL-6分别为(0.17±0.03),(0.38±0.05),(0.29±0.05),(0.24±0.04)μmol·L-1,与模型组比较,低、高剂量实验组NF-кB和IL-6水平显著降低(P<0.05).经过血塞通处理后,ROS浓度降低.蛋白质印迹表明,LPS刺激显著抑制了IκBα表达,上调p-p65表达水平,而血塞通可以显著上调被LPS刺激细胞的IκBα表达,降低p-p65的表达水平(均P<0.05).结论 血塞通能够阻止由LPS引起的心肌细胞炎症反应的发生,降低心肌细胞损伤.
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