【摘 要】
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目的构建含OVA-Fc融合基因的真核表达质粒,证明其能在真核细胞CHO细胞表达.方法通过PCR从OVA-pcDNA3.1质粒中扩增出全长的小鼠OVA cDNA,酶切后克隆到含有小鼠IgG2a Fc cDNA的
【机 构】
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第三军医大学新桥医院全军肿瘤中心,第三军医大学新桥医院全军呼吸研究所,第三军医大学基础部全军免疫学研究所
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目的构建含OVA-Fc融合基因的真核表达质粒,证明其能在真核细胞CHO细胞表达.方法通过PCR从OVA-pcDNA3.1质粒中扩增出全长的小鼠OVA cDNA,酶切后克隆到含有小鼠IgG2a Fc cDNA的真核载体pMIgV,然后将OVA-Fc酶切后亚克隆入pcDNA3.1,构建真核表达载体OVA-Fc-pcDNA3.1;脂质体转染法将其导入CHO细胞,流式细胞仪、Western blot、ELISA法检测融合蛋白OVA-Fc的表达.结果酶切鉴定和序列测定证明真核表达载体OVA-Fc-pcDNA3.1构
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