促凋亡因子Smac／DIABLO与核受体NR4A1相互作用的筛选和鉴定

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：manhong85

【摘要】

：

目的利用酵母双杂交技术筛选线粒体促凋亡因子野生型Smac／DIABLO的相互作用蛋白。方法①设计促凋亡因子野生型Smac／DIABLO引物，利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增野生型Smac／DIABLO

【作者】

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张翠莉杨晓明成海恩刘涛王应雄

【机构】

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重庆医科大学公共卫生学院生殖医学系遗传学教研室,军事医学科学院放射医学研究所,重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,第三军医大学西南医院全军感染病研究所

【出处】

：

第三军医大学学报

【发表日期】

：

2007年6期

【关键词】

：

SMAC/DIABLO NR4A1 酵母双杂交 Smac/DIABLO NR4A1 yeast two-hybrid

【基金项目】

：

国家高技术研究发展计划项目（20048A711A19）

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目的利用酵母双杂交技术筛选线粒体促凋亡因子野生型Smac／DIABLO的相互作用蛋白。方法①设计促凋亡因子野生型Smac／DIABLO引物，利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增野生型Smac／DIABLO基因片段，构建酵母真核表达载体pDBLeu—Smac／DIABLO。②pDBLeu—Smac／DIABLO诱饵质粒转化酵母MAY203，Westernblot检测融合蛋白在酵母中的正确表达，自激活作用的检测并确定抑制His基础表达的3AT浓度。③对成人肝eDNA文库的筛选。选择能同时激活His、Ura、L

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