【摘 要】
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目的:探讨集落刺激因子1(CSF1)通过CSF1受体(CSF1R)减轻缺氧缺血性脑病(HIE)大鼠神经元凋亡的下游信号通路.方法:采用原代大鼠皮质神经元建立氧糖剥夺(OGD)神经元损伤模型,重组人CSF1(rh-CSF1)干预该模型,通过CCK-8和MTT检测细胞活力,测定LDH漏出,Western blot检测CSF1、CSF1R、磷脂酶C-γ2(PLCG2)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、Bax、Bcl-2和cleaved caspase-3蛋白水平.建立
【机 构】
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贵州省人民医院神经内科,贵州贵阳550000
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目的:探讨集落刺激因子1(CSF1)通过CSF1受体(CSF1R)减轻缺氧缺血性脑病(HIE)大鼠神经元凋亡的下游信号通路.方法:采用原代大鼠皮质神经元建立氧糖剥夺(OGD)神经元损伤模型,重组人CSF1(rh-CSF1)干预该模型,通过CCK-8和MTT检测细胞活力,测定LDH漏出,Western blot检测CSF1、CSF1R、磷脂酶C-γ2(PLCG2)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、Bax、Bcl-2和cleaved caspase-3蛋白水平.建立大鼠HIE模型,Western blot检测造模后6 h、12 h、24 h、48 h、72 h和7 d ERK1/2和Nrf2的表达,以及予rh-CSF1、BLZ945(CSF1R阻断剂)和U73122(PLCG2阻断剂)干预模型后ERK1/2、Nrf2、Bax、Bcl-2和cleaved caspase-3的表达.结果:细胞实验提示,与OGD组相比,rh-CSF1干预提高了大鼠神经元的细胞活力,并减少LDH外漏(P<0.05);Western blot显示,与OGD组相比,rh-CSF1干预后p-CSF1R、p-PLCG2、p-ERK1/2、p-Nrf2和Bcl-2/Bax蛋白水平上升,cleaved caspase-3水平降低(P<0.05).动物实验提示,p-ERK1/2和p-Nrf2在HIE大鼠表达逐渐增多,并在24 h达到峰值,之后逐渐降低(P<0.05).此外,应用CSF1R阻断剂或PLCG2阻断剂干预可抑制rh-CSF1的作用,使HIE大鼠脑组织p-ERK1/2、p-Nrf2和Bcl-2/Bax水平下降,cleaved caspase-3水平上升(P<0.05).结论:rh-CSF1可减少HIE大鼠神经元的凋亡;CSF1R/PLCG2/ERK/Nrf2信号通路参与介导CSF1此生物学功能.
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