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目的:研究光动力作用对活体肝组织的损伤,探讨光动力治疗的可行性,为临床治疗提供实验依据.
方法:动物实验:将小鼠分成光动力疗法(PDT)组、单血卟啉衍生物(HpD)组、激光组和空白对照组.光敏药物选用血卟啉衍生物,给药量每公斤体重10mg,药物用1ml生理盐水稀释,于实验前48h将药物注射入PDT组和HpD组小鼠腹腔内,避光饲养.将PDT组和激光组小鼠固定于实验板上.麻醉后,剖腹暴露右肝前叶,激光直接投照于肝脏表面,光斑直径5nm,照射2min.激光器为氩离子泵浦染料激光器系统,光波长630nm,输出功率100mW,每一照射区能量累积约60J,照光后关腹,回笼饲养观察.于照光后1、24、72、120h处死各组小鼠,剖腹取肝组织置于4℅福尔马林液中固定,常规石蜡包埋切片,HE染色,光镜观察.临床治疗:经病理确诊的肝癌患者,于治疗前48h做皮肤划痕试验,阴性者按每公斤体重5mg静脉给药.治疗时,在B超引导下,用18G肝穿针经皮穿刺,将石英光纤导入肝肿瘤内.激光波长630nm,输出功率350mW,每一照射点能量累积压20J.治疗1个月后行二期切除术.标本用4℅福尔马林固定,常规石蜡包埋切片,HE染色,光镜观察.
结果:动物实验光镜观察结果显示:PDT组于照光后24h出现照光区肝细胞大面积坏死,照光区周边肝细胞未见损伤,两者界限清楚,120h见坏死区周边纤维组织增生.激光照射组于照光后1h出现肝细胞肿胀,72h恢复正常,未见肝细胞损伤.HpD组和空白对照组未见肝细胞损伤.人肝癌PDT后切除标本光镜观察结果显示:肝肿瘤照射区见肝癌细胞大片坏死,肿瘤周边正常肝细胞未见损伤,但见大量淋巴细胞和巨噬细胞聚集.
结论:肝组织内的血卟啉衍生物可被激光激活,引发光动力反应,从而损伤肝细胞.这种损伤的范围有限.通过控制光辐照范围,可以避免肝组织大面积受损.