【摘 要】
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目的 研究灯盏细辛对人脉络膜黑色素瘤(CM)细胞凋亡的影响及作用机制.方法 将体外培养的OCM-1细胞分为对照组(NC组,正常培养液培养)、灯盏细辛低浓度组(LC组,浓度为1μmol/L)、灯盏细辛中浓度组(MC组,浓度为10 μmol/L)及灯盏细辛高浓度组(HC组,浓度为100 μmol/L),均培养48 h.CCK-8法测定细胞增殖率,Hoechst 33258核染色法观查细胞核凋亡,Annexin V/PI检测细胞凋亡,Western blot法检测OCM-1细胞内Bax及Bcl-2蛋白表达.结果
【机 构】
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哈尔滨医科大学附属第一医院,哈尔滨150001
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目的 研究灯盏细辛对人脉络膜黑色素瘤(CM)细胞凋亡的影响及作用机制.方法 将体外培养的OCM-1细胞分为对照组(NC组,正常培养液培养)、灯盏细辛低浓度组(LC组,浓度为1μmol/L)、灯盏细辛中浓度组(MC组,浓度为10 μmol/L)及灯盏细辛高浓度组(HC组,浓度为100 μmol/L),均培养48 h.CCK-8法测定细胞增殖率,Hoechst 33258核染色法观查细胞核凋亡,Annexin V/PI检测细胞凋亡,Western blot法检测OCM-1细胞内Bax及Bcl-2蛋白表达.结果 (1)细胞增殖率:与NC组比较,各组均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与LC组比较,MC组降低不明显,差异无统计学意义(P＞0.05);HC组明显降低,差异有统计学意义(t=5.639,P=0.000).HC组比MC组明显降低,差异有统计学意义(t=4.214,P=0.000).(2)细胞凋亡率:Hoechst 33258染色结果显示灯盏细辛干预后,高荧光类圆形细胞核数量增多,以HC组最为明显;与NC组比较,各组均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).与LC组比较,MC组升高不明显,差异无统计学意义(P＞0.05),HC组升高明显,差异有统计学意义(t=11.140,P=0.000).HC组比MC组明显升高,差异有统计学意义(t=11.020,P=0.000).(3)Bax蛋白表达:与NC组比较,各组均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).与LC组比较,MC组降低,HC组升高,差异均有统计学意义(tMC=17.48,tHC=19.433,均P=0.000).HC组比MC组升高,差异有统计学意义(t=3.680,P=0.006).(4)Bcl-2蛋白表达:与NC组比较,各组均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与LC组比较,MC组和HC组均降低,差异均有统计学意义(tMC=3.043,P=0.016,tHC=9.767,P=0.000).HC组比MC组降低,差异有统计学意义(t=7.267,P=0.000).结论 灯盏细辛通过改变线粒体凋亡途径中凋亡相关信号分子Bax及Bcl-2的表达,浓度依赖性抑制OCM-1细胞增殖并促进细胞凋亡.
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