【摘 要】
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原位缺口平移技术（ＩＳＮＴ）已被用于检测细胞核中ＤＮＡ断裂鉴别尸检组织中细胞的凋亡和坏死断裂、流行性出血热（ＥＨＦ）组织中存在散在单个细胞变性死亡和灶性梗死样坏死，前者带有细胞凋亡的特征。本
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原位缺口平移技术（ＩＳＮＴ）已被用于检测细胞核中ＤＮＡ断裂鉴别尸检组织中细胞的凋亡和坏死断裂、流行性出血热（ＥＨＦ）组织中存在散在单个细胞变性死亡和灶性梗死样坏死，前者带有细胞凋亡的特征。本文以ＥＨＦ肝脏和实验性病毒感染鼠脑组织为例，应用缺口平移法，在ＤＮＡ聚合酶或Ｋｌｅｎｏｗ酶的作用下，将地高辛标记的ｄＵＴＰ掺入合成到ＤＮＡ的断裂部位，通过碱性磷酸酶标抗地高辛抗体免疫组化法显示细胞ＤＮＡ的断裂，检测和鉴别细胞的凋亡和坏死。为分析死后解剖时间间隔及组织固定时间对该方法的影响，本文选用死后２～１４０ｈ尸检、经常规固定石蜡包埋后存放１０～３５年的标本和在１０％福尔马林固定了１０～３５年之后再进行常规处理的标本。实验时用蛋白酶Ｋ（ＰＫ）消化前后对比并分别在标记反应液中略去ＤＮＡ聚合酶作为阴性对照，用ＤＮＡ酶消化组织人为制造ＤＮＡ缺日作为阳性对照。结果发现，未经ＰＫ消化的组织，仅灶性肝细胞核ＩＳＮＴ标记阳性，经ＰＫ消化后，散在的带有凋亡特征的肝细胞胞核也出现阳性，灶性肝细胞胞核标记染色增强，但无论是蛋白酶消化与否，明确梗死样坏死的肝细胞均不被标记。结果还发现，死后２～２４ｈ内尸检组织和长时间（１０～３４年）存放的石?
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