【摘 要】
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从基因数据库中挖掘具有优良性能的酶蛋白已成为酶筛选的一个新方向。以选择性水解R-CNDE为目标反应,以能选择性水解R-CNDE的酯酶EstZF172的氨基酸序列信息在GenBank数据库中
【基金项目】
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江西省教育厅科技项目“立体选择性酶基因挖掘及其应用”(GJJ151211)
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从基因数据库中挖掘具有优良性能的酶蛋白已成为酶筛选的一个新方向。以选择性水解R-CNDE为目标反应,以能选择性水解R-CNDE的酯酶EstZF172的氨基酸序列信息在GenBank数据库中进行基因挖掘,筛选出同源性为90%、来源于荧光假单胞菌的酯酶PFE。根据PFE的氨基酸序列,对其进行生物信息学分析。合成PFE的基因序列并连接到表达载体pET-28b,转化E.coliBL21(DE3),成功构建PFE的工程菌。对PFE功能验证发现其对CNDE表现出良好的立体选择性,能选择性水解R-CNDE。最终获得了具
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