人脐静脉血内皮祖细胞的分离、培养及鉴定

来源 :中国实验诊断学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hahahuang
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目的体外分离、培养及鉴定人脐静脉血内皮祖细胞。方法密度梯度离心法分离培养人脐静脉血EPCs。、通过免疫荧光法观察内皮细胞吸收DiL-acLDL和FITC-UEA-I情况,流式细胞仪定量检测EPCs表面CD133、CD34和KDR抗原表达阳性率来鉴定EPCs。倒置显微镜下观察EPCs形态学变化,计数细胞并绘制生长曲线。结果培养细胞呈长梭形,接种2-4 d梭形形态细胞较少,为细胞生长的潜伏期;6-10 d贴壁梭形细胞逐渐增多,为对数增殖期;10-14 d细胞融合成集落样生长,梭形细胞明显增多,进入生长平台期。激光共聚焦显微镜鉴定DiL-acLDL、FITC-UEA-I双染阳性的细胞为正在分化的EPCs;流式细胞仪检测结果:细胞表达CD133、CD34和KDR抗原的阳性率分别为:7.3+2.71%、42.0+6.42%、89.3+10.45%。结论从人脐静脉血可分离、纯化、扩增培养出内皮祖细胞。
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