【摘 要】
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目的:构建肿瘤细胞特异性表达载体pcDNA3.1PLN-GFP及鉴定活性.方法:用2.4kb的L-plastin启动子,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告蛋白,通过分子克隆技术,构建真核表达载体pcDNA3.1PL
【机 构】
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吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室,吉林大学中日联谊医院神经外科,吉林大学第一医院普外科,吉林大学基础医学院免疫学教研室
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目的:构建肿瘤细胞特异性表达载体pcDNA3.1PLN-GFP及鉴定活性.方法:用2.4kb的L-plastin启动子,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告蛋白,通过分子克隆技术,构建真核表达载体pcDNA3.1PLN-GFP,用脂质体介导法转染肿瘤细胞和成纤维细胞后,流式细胞术(FACS)分析载体的肿瘤细胞特异性和活性.结果:仅在表达内源性L-plastin的肿瘤细胞和转化的293细胞中有GFP的表达,发光细胞比率较高,而且L-plastin启动子的活性与CMV启动子活性相当,而在其它细胞中没有检测到GFP的表达.结论:我们构建的pcDNA3.1PLN-GFP是一肿瘤特异性的高效表达载体.
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