山羊PGCs用于分离与克隆类ES细胞

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选择健康成年本地白山羊,自然发情、配种后44 d取胎儿,以传统的原始生殖细胞(PGCs)分离与克隆的方法和PGCs与其胎儿生殖嵴周围组织细胞共同培养的方法获得类胚胎干细胞(类ES细胞),并对山羊类ES细胞在不同饲养层上进行培养.结果表明.采用传统方法和共培养的方法并添加细胞因子均能分离获得类ES细胞.分离获得的类ES细胞在同源(山羊)胎儿细胞饲养层上生长效果较好,可传4代或5代,而在小鼠原代成纤维细胞饲养层上类ES细胞仅传3代.另外,共培养不添加细胞因子组仅获1个类ES细胞集落,传代后丢失.
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