HIF-2α siRNA 治疗人肝癌细胞株 HepG2的实验研究

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目的:应用 sirna 干扰肝癌细胞株 HepG2细胞内缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor, Hif)-2α的表达,对其潜在的治疗作用及其机制进行研究。方法应用 lipofectaminetM 2000将 control 或 Hif-2α sirna 转染入 HepG2细胞,在常氧或缺氧条件下培养48小时后进行相关检测。ccK-8法测定细胞的增殖活力,pi 染色后流式细胞仪分析细胞周期变化,Pi/annexinV 双染色后激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡情况,和 western blot 实验检测细胞内 Hif-2α、生长转化因子(transforming growth factor, tGf)-α、细胞周期蛋白 d1(cyclin d1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VeGf)的变化情况。结果在缺氧条件下,与 control sirna 相比,Hif-2α sirna 可明显抑制 HepG2细胞的增殖,增加 G1期细胞数并减少 s 期细胞数,促进细胞凋亡,并抑制 Hif-2α、tGf-α、cyclin d1和 VeGf 的表达。结论应用 sirna 干扰 Hif-2α表达可作为治疗肝癌的潜在治疗策略并值得深入研究。
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