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目的
探讨高磷诱导的磷酸钙晶体是否通过BMP-2/Smad信号通路激活人主动脉平滑肌细胞（HASMCs）成骨转分化。
方法高磷培养基在37℃孵育3 d，超速离心法分离磷酸钙晶体和上清液，扫描电镜和能量色散X射线光谱仪分析晶体理化特征。体外培养HASMCs，分为高磷组、对照组、晶体组和上清液组。茜素红染色和邻甲酚酞络合酮法测钙化结节和细胞内钙含量。Western印迹法测骨形态发生蛋白2（BMP-2）、转录因子RUNX2、骨桥蛋白（OPN）、磷酸Smad1/5/9（p-Smad1/5/9）蛋白表达。HASMCs分别进行BMP-2和Smad1基因敲减，Western印迹法测蛋白表达。
结果高磷培养基诱导磷酸钙晶体形成。与对照组相比，磷酸钙晶体促进HASMCs钙化结节形成，增加细胞内钙含量，上调BMP-2、RUNX2和OPN蛋白表达（均P<0.05）。磷酸钙晶体刺激HASMCs 30 min后，p-Smad1/5/9蛋白水平达到峰值（P<0.05）。敲减BMP-2基因后，磷酸钙晶体刺激HASMCs后p-Smad1蛋白表达受抑，RUNX2和OPN蛋白表达降低（均P<0.05）。敲减Smad1基因后，磷酸钙晶体刺激HASMCs后RUNX2和OPN蛋白表达降低（均P<0.05）。
结论高磷诱导的磷酸钙晶体通过BMP-2/Smad信号通路促进HASMCs成骨转分化。