【摘 要】
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L-天冬酰胺酶能够水解L-天冬酰胺生成L-天冬氨酸和氨,广泛存在于微生物、植物和部分啮齿类动物的血清中,在医药和食品行业中都具有重要应用.然而无论是在医药还是在食品行业中,L-天冬酰胺酶依然存在一些问题,如催化效率低、热稳定性差、产量低等.文中通过理性设计及5\'非翻译区(5\'untranslated region,5 \'UTR)改造提高米黑根毛霉Rhizomucor miehei来源的L-天冬酰胺酶(RmAsnase)的酶活及蛋白表达量.结果 显示,通过同源建模结合序列比对分析构建的6个
【机 构】
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江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122
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L-天冬酰胺酶能够水解L-天冬酰胺生成L-天冬氨酸和氨,广泛存在于微生物、植物和部分啮齿类动物的血清中,在医药和食品行业中都具有重要应用.然而无论是在医药还是在食品行业中,L-天冬酰胺酶依然存在一些问题,如催化效率低、热稳定性差、产量低等.文中通过理性设计及5\'非翻译区(5\'untranslated region,5 \'UTR)改造提高米黑根毛霉Rhizomucor miehei来源的L-天冬酰胺酶(RmAsnase)的酶活及蛋白表达量.结果 显示,通过同源建模结合序列比对分析构建的6个突变菌株中,突变酶A344E比酶活较野生酶提高了1.5倍.继而构建食品安全菌株枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 168/pMA5-A344E,对其进行UTR改造,获得重组菌株B.subtilis 168/pMA5 UTR-A344E,其酶活较原始菌提高了7.2倍,对重组菌B.subtilis 168/pMA5 UTR-A344E进行5L罐研究,最终产量为489.1 U/mLo该酶活提高的重组菌株对L-天冬酰胺酶的工业化应用具有重要价值.
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微生物重组表达胶原蛋白来源清洁,同时具有序列设计灵活和高产量高纯度等优点,作为生物材料在组织工程等领域具有广泛的应用前景.然而如何促进重组胶原分子交联,使其形成更加稳定的空间结构是设计重组胶原纳米材料需要克服的难点.文中通过双质粒系统将非天然氨基酸O-(2-溴乙基)-酪氨酸引入细菌胶原蛋白序列中,并对其发酵条件进行优化,结果表明在25℃下,以终浓度为0.5 mmol/L的IPTG和0.06％的阿拉伯糖诱导24 h可以获得高纯度含非天然氨基酸的胶原蛋白.将含非天然氨基酸的胶原蛋白与含半胱氨酸的胶原蛋白在pH
为了研制A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)的病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)疫苗,以SVA田间流行毒株CH-FJ-2017结构蛋白基因序列为研究对象,构建了能够同时表达SVA的3种结构蛋白VP0、VP1和VP3的单个原核重组表达质粒pET28a-SVA-VP031.通过大肠杆菌Escherichia coli表达、亲和层析纯化和体外自组装,获得SVA VLPs.透射电子显微镜鉴定显示,SVA的3种结构蛋白在体外能够自组装成直径约25-30 nm的VLPs,
扬子江腾入海流，横垣一坝著千秋。 明灯点亮中华土，试看宇环谁作酋。 元旦新语 千千彩信賀新年，我作小诗拈雪髯。 自在频邀明月饮，悠然不为利名牵。 清廉从政千夫敬，枉法为人万古鞭。 铭刻前车之鉴事，终生不会筑悲惭。 见仁见智 江心翠影片帆轻，苍岭孤烟落照明。 骚客歌吟《风雅颂》，弗闻诮语自多情。 异口同声 游士乘秋正幸浓，齐呼今夜好蟾宫。 忽闻舟尾琴声出，俱怨孤芳趣不同。
随着我国畜牧业迅速发展,对优质粗饲料的需求日渐增加,使饲草的供应越来越紧缺,因而寻求可缓解传统饲料不足的新型饲料变得尤为重要.木本饲料是一种新型饲料,具有资源丰富、产量高、粗蛋白含量高等特点,合理开发利用可缓解我国畜多草少的压力.青贮可高质量保存和保全饲草营养养分,是木本饲料重要的贮藏方式.近年来,与木本饲料青贮相关的研究逐渐增多.本文总结了木本饲料营养特点及其影响因素、自然青贮发酵特性及其影响因素及木本饲料青贮在畜禽生产中的应用,并对后续研究方向做出建议,以期为木本饲料青贮利用和发展提供参考依据.
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