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目的
观察人内皮祖细胞(hEPCs)移植对脊髓损伤(SCI)大鼠功能恢复的影响。
方法24只SD大鼠均先用快尖刀片将脊髓T10节段完全横断完成动物模型制作,操作过程中死亡5只。后将19只脊髓横断大鼠随机分为实验组(10只)和对照组(9只)。实验组采用损伤脊髓处注射hEPCs(human Endothelial Progenitor Cells)悬液7.5 μL,对照组损伤脊髓邻近区注射等量DMEM(Dulbecco minimum essential medium)培养液,术后每天腹腔注射免疫抑制剂环抱素A,在术后1、2、4、6、8周进行Basso Beatlie Bresnahan(BBB)评分来记录SCI大鼠双下肢神经功能恢复情况。术后8周处死大鼠,取出横断脊髓进行免疫组织化学和原位杂交技术,检测移植的hEPCs在大鼠横断脊髓内的存活情况。
结果SCI模型制作后2周内,实验组和对照组的BBB评分差异均无统计学意义(t=0.61、0.69,均P>0.05)。术后第4周开始,实验组的BBB评分[(1.67±0.71)分]大于对照组的(1.11±0.60)分,差异有统计学意义(t=3.16,P<0.05)。第8周时分别为实验组(4.00±1.41)分和对照组(1.44±0.89)分,差异有统计学意义(t=5.384,P<0.05)。SCI 4、6、8周,实验组后肢功能恢复明显好于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。原位杂交和免疫组化检测显示移植的hEPCs不仅能在宿主体内存活而且部分hEPCs嵌合到SCI后大鼠的脊髓及其血管系统。
结论hEPCs移植后,能够在SCI后大鼠脊髓内存活、并分化为血管内皮细胞,并且促进脊髓神经功能的恢复。