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目的：探讨转录因子E2F调控长链非编码RNA（long noncoding RNA, lncRNA） HOTAIR在高磷（high phosphorus, HP）诱导血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）钙化中的作用及其机制。方法：体外培养人VSMCs，采用HP（10 mmol/L β-磷酸甘油酯）诱导构建VSMCs钙化模型，设置实验分组：正常对照（control）组和HP组。采用试剂盒进行钙沉积含量测定；RT-qPCR检测VSMCs中E2F mRNA、lncRNA HOTAIR和Klotho mRNA的表达；Western blot检测E2F和Klotho蛋白的表达。过表达E2F，设置实验分组：control组、HP组、HP+空载（HP+Adlaz）组和HP+过表达E2F（HP+AdE2F）组。茜素红染色评估细胞钙化并进行钙沉积含量测定；RT-qPCR检测VSMCs中E2F mRNA、lncRNA HOTAIR和Klotho mRNA的表达；Western blot检测E2F和Klotho蛋白的表达；双萤光素酶报告基因检测验证E2F、lncRNA HOTAIR和Klotho的靶向关系。结果：与control组相比较，HP组细胞呈现明显的钙化，钙沉积含量增加；RT-qPCR显示E2F mRNA、lncRNA HOTAIR和Klotho mRNA在HP组中表达下调；Western blot提示E2F和Klotho蛋白在HP组表达下调。过表达E2F后，HP+AdE2F组细胞较HP+Adlaz组减轻，钙沉积含量减少；RT-qPCR提示lncRNA HOTAIR和Klotho mRNA在HP+AdE2F组中表达上调，Western blot显示E2F和Klotho蛋白在HP+AdE2F组中表达上调。双萤光素酶报告基因系统检测提示E2F的表达水平与lncRNA HOTAIR呈现显著正相关，同时表明Klotho为lncRNA HOTAIR的靶基因。结论：E2F通过调控lncRNA HOTAIR介导Klotho，从而抑制HP诱导的VSMCs钙化。