扶正抑瘤汤诱导肝癌HepG2细胞凋亡及自噬作用研究

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目的:探讨扶正抑瘤汤对肝癌HepG2细胞的诱导凋亡及自噬的调控作用。方法:50只裸鼠分为5组,即生理盐水组,扶正抑瘤汤高(32g/kg)、中(16g/kg)、低(8g/kg)剂量组,5-Fu(17mg/kg)组,每组10只,建立人肝癌细胞HepG-2移植瘤裸鼠模型,待肿瘤体积长到约100 mm3时开始用药,扶正抑瘤汤灌胃给药(每日1次),5-Fu组(每周两次)和生理盐水对照组采用腹腔注射(每日1次),给药18天,于停药第2天各组处死裸鼠,剥离肿瘤称重,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率;留取肿瘤组织,Tunel染色检测扶正抑瘤汤对移植瘤细胞凋亡的作用;透射电镜(TEM)检测自噬体形成情况,Western blot检测自噬相关蛋白(Beclin 1、Bnip3及LC3)表达变化。结果:扶正抑瘤汤高、中、低剂量组抑瘤率分别是49.9%,21.6%,8.2%,5-Fu组抑瘤率为74.2%,与对照组比较,扶正抑瘤汤高(32g/kg)、中剂量组(16g/kg)与5-Fu组均能抑制肿瘤生长,其中以高剂量组和5-Fu组效果最佳;Tunel染色发现,与对照组比较,扶正抑瘤组和5-Fu组均可见到大量凋亡肿瘤细胞,其中以扶正抑瘤高剂量组诱导肿瘤细胞凋亡效果最佳,扶正抑瘤汤中、低剂量组和对照组则无明显差异;电镜结果显示:扶正抑瘤组和5-Fu组均可见到大量自噬小体,随着药物浓度降低自噬小体减少,之间呈正相关,其中以高剂量组效果最佳,对照组未发现自噬小体;Westen-blot检测结果显示:与对照组比较,扶正抑瘤组和5-Fu组均可使自噬相关蛋白Beclin 1、Bnip3及LC3表达上调,且与药物的浓度呈相关性,其中以扶正抑瘤高剂量组效果最佳。结论:扶正抑瘤汤对裸鼠肝癌转移瘤HepG2具有抑制肿瘤细胞生长,诱导肿瘤细胞凋亡的作用,并且可激活肝癌HepG2细胞Beclin 1、Bnip3及LC3蛋白的表达,从而诱导肿瘤细胞发生自噬,其中以药物高剂量组(32g/kg)效果最佳。
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