间充质干细胞对大鼠退变软骨细胞的作用

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目的 探讨间充质干细胞(MSCs)对大鼠退变软骨细胞的作用.方法 取SD大鼠骨髓,分离单核细胞,贴壁培养,用诱导培养基对细胞进行定向诱导.采用油红O、茜素红和番红O染色检测定向诱导效果.第3代MSCs种植在Transwell膜上,第2代软骨细胞种植在6孔板底部.IL-1β诱导后,收集单独培养和与MSCs共培养3d的软骨细胞,采用RT-PCR及Western blot法分别检测Ⅱ型胶原(Col2)、蛋白聚糖mRNA和蛋白的表达,同时收集单独培养及与MSCs共培养1 d的软骨细胞检测环氧合酶2(COX-2)、MMP-13 mRNA和蛋白的表达.结果 所得到的MSCs形态均一,呈长梭形,类似成纤维细胞的形态.经呈脂肪、成骨、软骨细胞诱导培养后,油红O、茜素红及番红O染色显示MSCs有向以上3个方向诱导分化的特性.MSCs抑制IL-1β诱导的大鼠软骨细胞内MMP-13和COX-2的表达,增加Col2和蛋白聚糖的表达.结论 MSCs通过下调退变软骨细胞中MMP-13和COX-2的表达,抑制了Col2和蛋白聚糖的降解,对大鼠退变软骨细胞有明显改善作用.
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