【摘 要】
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【目的】本研究旨在探讨蜕皮激素合成通路相关CYP450基因的表达规律，为害虫防治提供潜在的作用靶标。【方法】以家蚕Bombyx mori CYP450基因为查询序列，通过同源比对的方法从斜纹夜蛾Spodoptera litura基因组中鉴定蜕皮激素合成代谢通路中的CYP450基因，并构建其系统进化树；采用qPCR法检测鉴定的CYP450基因在斜纹夜蛾不同发育阶段（6龄幼虫、预蛹和蛹）、这3个发育阶
【机 构】
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华南师范大学生命科学学院广东省昆虫发育生物学与应用技术重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（32272523,31872285,31672357）；
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【目的】本研究旨在探讨蜕皮激素合成通路相关CYP450基因的表达规律，为害虫防治提供潜在的作用靶标。【方法】以家蚕Bombyx mori CYP450基因为查询序列，通过同源比对的方法从斜纹夜蛾Spodoptera litura基因组中鉴定蜕皮激素合成代谢通路中的CYP450基因，并构建其系统进化树；采用qPCR法检测鉴定的CYP450基因在斜纹夜蛾不同发育阶段（6龄幼虫、预蛹和蛹）、这3个发育阶段的不同组织（中肠、表皮和脂肪体）以及4龄幼虫取食不同寄主植物（辣椒Capsicum annuum、黄瓜Cucumis sativus、番薯Ipomoea batatas和花生Arachis hypogaea）叶片后5龄幼虫中肠中的表达量，计算4龄幼虫取食不同寄主植物叶片后发育至蛹的历期；应用PITA, miRanda, microTar和RNAhybrid 4种软件，预测调控鉴定的CYP450基因的微小RNA （miRNA）。【结果】鉴定到斜纹夜蛾蜕皮激素合成通路相关的6个直系同源CYP450基因CYP307A1,CYP306A1,CYP302A1,CYP315A1,CYP314A1和CYP18A1;系统进化树显示，斜纹夜蛾这6个CYP450基因分别归属于CYP2和线粒体CYP两个亚家族。CYP306A1,CYP314A1和CYP18A1分别在6龄幼虫、预蛹和蛹期具有最高的表达量，并且分别在6龄幼虫中肠、预蛹脂肪体和蛹表皮中表达量最高。相比取食人工饲料的对照组，4龄幼虫取食番薯和花生叶片后斜纹夜蛾4龄幼虫发育至蛹的历期显著延长，CYP306A1在5龄幼虫中肠中的表达量显著上调。在CYP307A1,CYP315A1,CYP314A1和CYP18A1上鉴定出了多种miRNA结合位点。【结论】蜕皮激素合成代谢通路中，CYP306A1,CYP314A1和CYP18A1可能分别在斜纹夜蛾幼虫、预蛹和蛹期起着关键的调控作用，同时也参与宿主植物次生代谢产物的解毒代谢，并且受到miRNA的严密调控。研究结果不仅有助于深入理解昆虫变态发育调控的复杂机制，还为将来的害虫防治提供了潜在的作用靶标，有利于斜纹夜蛾等害虫的可持续治理。
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