重组H9N2亚型禽流感病毒的构建及其在A549细胞上适应性研究

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目的: 利用反向遗传技术构建表达GFP并具有感染性的重组H9N2亚型禽流感病毒,并用高剂量和低剂量MOI病毒感染肿瘤细胞A549,研究其对A549肿瘤细胞的作用.方法: 以A/Chicken/Jiangsu/14(H9N2)禽流感病毒为骨架,在NS1和NEP之间插入外源片段GFP.参考8质粒转染系统,在293T和MDCK细胞上包装产生重组H9N2病毒.提取尿囊液RNA,PCR鉴定并测序,检测其TCID50.按照MOI 0.1和2.0分别将重组病毒感染不同的细胞,通过MTT实验检测细胞活性.结果: 应用反向
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