【摘 要】
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目的 观察电针“百会”“肾俞”穴对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区GSK3β信号通路相关蛋白的影响及机制研究.方法 30只SPF级SD雄性大鼠随机分成假手术组、模型组和电针组,每组10只.除假手术组外,其余各组大鼠双侧海马区各注射5μLβ淀粉蛋白25-35(Aβ25-35)制备AD模型,假手术组给予同等剂量生理盐水注射.假手术组、模型组正常喂养,不做干预处理,电针组选取百会及肾俞穴(两侧肾俞穴交替选择)进行电针治疗,频率2 Hz,电流1 mA,每日1次.每个疗程6天,共2个疗程,两个
【机 构】
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湖北中医药大学针灸骨伤学院 武汉 430061;湖北中医药大学老年医学研究所 武汉 430061;湖北中医药大学基础医学院 武汉 430061
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目的 观察电针“百会”“肾俞”穴对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区GSK3β信号通路相关蛋白的影响及机制研究.方法 30只SPF级SD雄性大鼠随机分成假手术组、模型组和电针组,每组10只.除假手术组外,其余各组大鼠双侧海马区各注射5μLβ淀粉蛋白25-35(Aβ25-35)制备AD模型,假手术组给予同等剂量生理盐水注射.假手术组、模型组正常喂养,不做干预处理,电针组选取百会及肾俞穴(两侧肾俞穴交替选择)进行电针治疗,频率2 Hz,电流1 mA,每日1次.每个疗程6天,共2个疗程,两个疗程间隔1天.治疗结束后第2天上午8点开始Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)检测大鼠学习记忆能力,行为学实验结束后第2天取材.苏木精-伊红染色(Hematoxylin eosin staining,HE)观察海马CA1区病理形态改变.免疫组化法(Immunohistochemical method,IHC)检测大鼠海马区Tau蛋白磷酸化的表达,及糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase3β,GSK3β)信号通路相关蛋白表达.免疫印迹法(Western blot,WB)检测磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、GSK3β相关蛋白的表达.聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测AKT、GSK3βmRNA的表达.结果 与假手术组相比:模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01),穿越平台次数明显减少(P<0.01),目标象限停留时间明显缩短(P<0.01);模型组海马区Tau蛋白磷酸化水平明显提高(P<0.01),GSK3β蛋白表达水平明显提高(P<0.01);模型组PI3K(P85)、AKT(Ser473)、GSK3β(Ser9)蛋白相对表达量降低(P<0.05);模型组AKT mRNA表达水平明显降低(P<0.01),GSK3βmRNA表达水平明显提高(P<0.01).与模型组相比:电针组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),穿越平台次数明显增加(P<0.01),目标象限停留时间明显延长(P<0.01);电针组海马区Tau蛋白磷酸化水平明显降低(P<0.01),GSK3β蛋白表达水平明显降低(P<0.01);电针组PI3K(P85)、AKT(Ser473)、GSK3β(Ser9)蛋白相对表达量增加(P<0.05);电针组AKT mRNA表达水平明显提高(P<0.01),GSK3βmRNA表达水平明显降低(P<0.01).结论 电针治疗能够有效改善AD大鼠学习记忆能力,其机制可能与影响GSK3β信号通路相关蛋白表达从而抑制Tau蛋白磷酸化有关.
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