猪SLA—DRB基因的克隆及在大肠杆菌的表达

来源 :甘肃畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bd05082052
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试验旨在通过基因工程方法获得重组猪SLA—DRB蛋白。根据基因库猪SLA—DRB基因序列设计合成特异性引物,引物两端分别加上BamHⅠ和XhoⅠ酶切住点及保护碱基;提取长白猪肠系淋巴结RNA,用RT—PCR的方法扩增猪SLA—DRB基因cDNA,并将其克隆到pMD18-T载体上,测序后经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后克隆到pET~32a(+)中,构建原核表达载体pET-32a—DRB;将重组表达质粒转化至宿主菌Rosseta中,诱导表达。结果表明,成功扩增出猪sLA—DRB基因cDNA,经DNA序列测定,所
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