拟南芥蛋白磷酸酶TOPP4的原核表达和多克隆抗体纯化

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以拟南芥野生型Col-0为材料,对其Ⅰ型蛋白磷酸酶(TOPP)家族进行序列分析,对家族成员之一的TOPP4进行原核表达及多克隆抗体的制备和纯化.结果显示:(1)该研究构建出原核表达载体pEGM-4T-3-TOPP4和pET-28a-GFP-N150并转入大肠杆菌BL21(DE3)中.(2)经IPTG诱导,表达出分子量约为62 kD的GST-TOPP4和分子量约为34 kD的His-GFP-N150可溶性重组蛋白.(3)纯化的重组蛋白GST TOPP4作为抗原免疫新西兰兔后,获得了效价大于1∶400 000
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