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目的
探索细胞凋亡在纽兰格林－1减弱阿霉素所致心肌细胞损伤中的作用。
方法分离并培养1～2 d SD大鼠乳鼠原代心肌细胞，将细胞随机分为正常组、阿霉素组(1 μmol/L)、不同浓度梯度纽兰格林－1组(10～1 000 ng/ml)、磷酸肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002组(10 μmol/L)。TUNEL法检测心肌细胞凋亡水平，蛋白免疫印迹法(Western Blot，WB)检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl－2、细胞色素C、Cleaved caspase 3水平及丝氨酸－苏氨酸激酶(Akt)总蛋白及其磷酸化水平。
结果与阿霉素组相比，纽兰格林－1呈浓度依赖性升高阿霉素诱导的低水平心肌细胞活性，特别是1 000 ng/ml处理组效果最为显著[(58.45±6.24)%比(96.32±5.42)%, P<0.05]。与阿霉素组相比，纽兰格林－1可以降低阿霉素所致的细胞凋亡蛋白Cleaved caspase 3[(2.92±0.34)%比(1.34±0.25)%, P<0.05]、cytochrome c[(1.92±0.21)%比(0.87±0.13)%, P<0.05]的表达水平，纽兰格林－1使Akt的磷酸化水平显著升高[(0.83±0.21)%比(2.02±0.13)%，P<0.05]。与纽兰格林－1联合阿霉素相比，加用PI3K抑制剂LY294002可阻断纽兰格林－1对Akt的磷酸化作用，Bcl－2/Bax蛋白表达水平比值降低[(0.91±0.19)%比(0.48±0.15)%，P<0.05]，细胞凋亡率明显升高[(1.76±0.28)%比(5.43±0.31)%，P<0.05]。
结论PI3K/Akt信号通路介导纽兰格林－1抑制阿霉素所致的心肌细胞凋亡。