吸入氢气对脓毒症小鼠急性肺损伤时肺组织Rho/ROCK通路的影响

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目的

评价吸入氢气对脓毒症小鼠急性肺损伤时肺组织Rho/Rho激酶(ROCK)通路的影响。

方法 

雄性C57BL/6小鼠40只,体重20~25 g,6周龄,采用随机数字表法,将其分为4组(n=10):假手术组(Sh组)、假手术+吸入氢气组(H2组)、脓毒症组(S组)和脓毒症+吸入氢气组(S+H2组)。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型。于CLP术后1和6 h时H2组和S+H2组分别吸入2%氢气,时间分别为1 h。于CLP术后24 h时处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定蛋白浓度,进行中性粒细胞(PMN)计数,采用ELISA法检测BALF中TNF-α和IL-1β的浓度。取肺组织,行病理学损伤评分,确定湿重/干重(W/D)比值,测定髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,并采用Western blot法测定肺组织Rho、ROCK1、ROCK2和活化型caspase-3的表达水平以及肌球蛋白磷酸酯酶目标亚基1(MYPT-1)的磷酸化水平。

结果 

与Sh组比较,S组和S+H2组BALF蛋白浓度、PMN计数、TNF-α和IL-1β浓度、肺损伤评分、肺组织W/D比值、MPO和MDA水平升高,肺组织SOD活性降低,肺组织Rho、ROCK1、ROCK2和活化型caspase-3表达上调,肺组织MYPT-1磷酸化水平升高(P<0.05),H2组上述指标比较差异均无统计学意义(P>0.05);与S组比较,S+H2组BALF蛋白浓度、PMN计数、TNF-α和IL-1β浓度、肺损伤评分、肺组织W/D比值、MPO和MDA水平降低,肺组织SOD活性升高,肺组织Rho、ROCK1、ROCK2和活化型caspase-3表达下调,肺组织MYPT-1磷酸化水平降低(P<0.05)。

结论

吸入氢气减轻脓毒症小鼠急性肺损伤的机制与抑制Rho/ROCK通路激活有关。

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