探讨Ether à go－go 1 (Eag1)在人骨肉瘤细胞和组织中的表达及其调控骨肉瘤恶性表型的分子机制。
方法采用逆转录－聚合酶链反应(RT－PCR)、Western blot和免疫组化检测骨肉瘤细胞和组织中Eag1的表达。采用小干扰RNA (siRNA)抑制Eag1的表达，并采用CCK－8法、克隆形成实验、Transwell体外侵袭实验和划痕实验检测Eag1 siRNA转染后骨肉瘤细胞增殖和侵袭能力的变化。建立裸鼠骨肉瘤异种移植模型，绘制肿瘤生长曲线，Western blot检测骨肉瘤细胞中血管内皮生长因子(VEGF)和信号转导和转录激活因子3 (STAT3)的表达水平。
结果Eag1在MG－63、Saos－2细胞及骨肉瘤组织中异常高表达。CCK－8法检测显示，MG－63和Saos－2细胞中，对照组、Eag1 siRNA1组和Eag1 siRNA2组的细胞存活率分别为(100.00±4.65)%、(63.57±3.89)%、(54.13±3.70)%和(100.00±5.46)%、(56.70±5.34)%、(40.27±5.28)%，与对照组比较，差异均有统计学意义(均P<0.001)。克隆形成实验显示，MG－63和Saos－2细胞中，对照组、Eag1 siRNA1组和Eag1 siRNA2组的克隆形成率分别为(92.00±3.46)%、(60.00±3.06)%、(53.67±2.40)%和(92.00±5.57)%、(52.33±5.13)%、(41.67±2.73)%，与对照组比较，差异均有统计学意义(均P<0.001)。裸鼠骨肉瘤生长结果显示，从治疗后第10天起，Eag1 siRNA1组和Eag1 siRNA2组裸鼠的骨肉瘤体积小于对照组，差异有统计学意义(均P<0.01)。侵袭实验显示，MG－63和Saos－2细胞中，对照组、Eag1 siRNA1组和Eag1 siRNA2组的侵袭细胞数分别为(134.00±3.61)个、(105.20±2.52)个、(91.00±3.01)个和(132.30±3.23)个、(114.30±3.48)个、(82.67±6.33)个，与对照组比较，差异均有统计学意义(均P<0.01)。划痕实验显示，MG－63和Saos－2细胞中，对照组、Eag1 siRNA1组和Eag1 siRNA2组的细胞迁移率分别为(62.48±1.83)%、(35.98±1.23)%、(32.30±1.20)%和(70.15±1.42)%、(41.38±1.34)%、(32.40±1.92)%，与对照组比较，差异均有统计学意义(均P<0.001)。沉默Eag1基因可明显下调骨肉瘤中VEGF及STAT3蛋白的表达。
结论Eag1可能通过调控STAT3－VEGF信号通路参与骨肉瘤细胞的增殖和侵袭过程，可作为骨肉瘤潜在的治疗靶点。