【摘 要】
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筛选获得促进大肠杆菌质粒扩增的最优氯霉素浓度。采用单因素控制变量法,通过质粒转化、摇菌、质粒提取、PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳检测等方法,并设置菌液培养时间梯度与氯霉
【机 构】
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贵州大学昆虫研究所/贵州山地农业病虫害重点实验室
【基金项目】
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资源昆虫学研究科技创新团队(黔教合人才团队字[2015]71);贵州省昆虫信息系统与资源开发利用重点实验室(黔科合LH字[2015]7685号);国家自然科学基金项目(81803968)
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筛选获得促进大肠杆菌质粒扩增的最优氯霉素浓度。采用单因素控制变量法,通过质粒转化、摇菌、质粒提取、PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳检测等方法,并设置菌液培养时间梯度与氯霉素浓度梯度,分析不同浓度的氯霉素对大肠杆菌质粒扩增的影响。结果显示未加氯霉素的大肠杆菌菌液培养18 h时,质粒浓度最高,为(605.425±63.241)ng/μL;菌液培养18 h时加入10~250μg/mL的氯霉素对质粒扩增皆具促进作用;且浓度为150μg/mL时,质粒的扩增效率最高,为(645.425±45.042)n
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