【摘 要】
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为成功研制BVDV重组抗原蛋白（NS5A、E0、E2、mE2T）亚单位疫苗并对比分析其免疫效价，本研究对BVDV的4种不同功能蛋白进行原核表达后，与弗氏佐剂乳化进而研制成亚单位疫苗。然后，选择105只BALB/c小鼠为试验动物，将其随机分成7组进行3次免疫，以便从细胞免疫和体液免疫方面评估其免疫效果。在第3次免疫后第14天对小鼠进行攻毒，通过qRT-PCR方法测定小鼠体内BVDV病毒的拷贝量。结果
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（31260610，31760737）； 新疆生产建设兵团科技攻关项目“犊牛健康养殖关键技术继承与示范”（2018AB041）； 新疆生产建设兵团科技发展专项资金“牛病毒性腹泻黏膜病（BVDV）快速诊断试剂盒的研发与应用”（2017BA044）； 十二师重大科技
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为成功研制BVDV重组抗原蛋白（NS5A、E0、E2、mE2T）亚单位疫苗并对比分析其免疫效价，本研究对BVDV的4种不同功能蛋白进行原核表达后，与弗氏佐剂乳化进而研制成亚单位疫苗。然后，选择105只BALB/c小鼠为试验动物，将其随机分成7组进行3次免疫，以便从细胞免疫和体液免疫方面评估其免疫效果。在第3次免疫后第14天对小鼠进行攻毒，通过qRT-PCR方法测定小鼠体内BVDV病毒的拷贝量。结果，成功研制出BVDV重组亚单位疫苗。3次免疫后，与免疫前相比，各组小鼠白细胞数量显著上升（P＜0.05），其中联合疫苗组攻毒前、后白细胞数量最高，攻毒前为6.48±0.19，攻毒后为6.08±0.82。在3次免疫之后，联合疫苗组的抗体水平最高，在倍比稀释后为0.573±0.055，灭活疫苗为0.552±0.027；亚单位疫苗组中mE2T组的抗体水平最高，为0.535±0.028。MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖时发现，联合疫苗组的SI值最高，为1.963。抗体中和试验证明，各个疫苗组的小鼠血清对病毒均有一定的中和能力，其中联合疫苗组的中和能力最强，达到了1:18.2。qRT-PCR分析小鼠体内病毒的拷贝量，发现联合疫苗组小鼠体内病毒拷贝量最低，为1×102.3/mL。上述研究结果为BVDV的预防和控制提供了基础，也为新型疫苗的研制提供了依据。
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