【摘 要】
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目的 探讨不同剂量长波紫外线(UVA)照射HacaT细胞后不同时间点诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的表达情况.方法 1J/cm2、5 J/cm2和10 J/cm2UVA照射HaCaT细胞后继续培养24 h、48 h和72 h,倒置相差显微镜下观察细胞形态的变化;分别用RT-PCR、Western印迹和Griess法检测HaCaT 细胞iNOS mRNA、蛋白及NO的表达.结果 所有UVA剂量组H
【机 构】
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目的 探讨不同剂量长波紫外线(UVA)照射HacaT细胞后不同时间点诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的表达情况.方法 1J/cm2、5 J/cm2和10 J/cm2UVA照射HaCaT细胞后继续培养24 h、48 h和72 h,倒置相差显微镜下观察细胞形态的变化;分别用RT-PCR、Western印迹和Griess法检测HaCaT 细胞iNOS mRNA、蛋白及NO的表达.结果 所有UVA剂量组HaCaT细胞iNOSmRNA在光照后24 h有表达.48 h达高峰,72 h后下降,各时间点间表达量差异有统计学意义(P＜0.05);1 J/cm2 UVA照射后3个时间点均未见iNOS蛋白表达,而5 J/cm2和10 J/cm2 UVA照射后iNOS蛋白在24 h增加,48 h达高峰且显著高于24 h(P＜0.05),照射后72 h无iNOS蛋白表达.所有UVA剂量组HaCaT细胞NO表达量在24 h升高,48 h显著升高,72 h平稳升高,3个时间点NO表达量均比正常对照组明显增加(P＜0.05).对照组HacaT细胞无iNOS mRNA和蛋白表达,NO表达量低.结论 HaCaT细胞iNOS和NO的表达变化与UVA照射存在时间和剂量关系。
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