【摘 要】
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在研究植物功能基因表达模式中肌动蛋白(Actin)编码基因是最常用的内参基因之一。本研究根据藜科植物Actin基因编码区保守序列设计一对简并引物,以盐生植物四翅滨藜(Atriplex
【机 构】
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兰州大学草地农业科技学院草地农业生态系国家重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金(31372360);“本科教学工程”国家级大学生创新创业训练计划项目(201610730105);“中央高校基本科研业务费专项资金”自由探索项目(lzujbky-2015-250)
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在研究植物功能基因表达模式中肌动蛋白(Actin)编码基因是最常用的内参基因之一。本研究根据藜科植物Actin基因编码区保守序列设计一对简并引物,以盐生植物四翅滨藜(Atriplex canescens)4周龄幼苗叶片的总RNA为模板,采用逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)方法扩增出Actin基因片段并连接到pMD19-T载体上,所得阳性克隆经PCR检测后进行测序。序列分析结果表明,该基因片段长度为598bp,编码198个氨基酸;该序列与Genbank中登录的高等植物Actin基因核苷酸序列同源性在84%以上,氨基酸序列同源性在94%以上。说明其为Actin基因片段,具有高度保守性,命名为AcACT。序列进化分析显示,AcACT与甜菜(Beta vulgaris)和碱蓬(Suaeda glauca)肌动蛋白编码基因的亲缘关系最近。荧光定量PCR分析结果表明,AcACT在盐处理下各组织中的表达量恒定。表明AcACT可作为内参基因来研究四翅滨藜耐盐相关基因的表达模式。
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