【摘 要】
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目的 从足细胞分子的角度探讨抗蛋白尿药物作用的细胞分子机制.方法建立阿霉素肾病大鼠模型.注射阿霉素后次日分别给予利生普利、泼尼松以及全反式维甲酸(ATRA)干预蛋白尿.注射阿霉素后第3、7、14、28天每组处死6只大鼠,留取肾脏标本.应用间接免疫荧光染色、实时PCR、Western印迹分别检测各个时间点nephrin、podocin、CD2相关蛋白(AP)、d辅肌动蛋白(actinin)-4的分布
【机 构】
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目的 从足细胞分子的角度探讨抗蛋白尿药物作用的细胞分子机制.方法建立阿霉素肾病大鼠模型.注射阿霉素后次日分别给予利生普利、泼尼松以及全反式维甲酸(ATRA)干预蛋白尿.注射阿霉素后第3、7、14、28天每组处死6只大鼠,留取肾脏标本.应用间接免疫荧光染色、实时PCR、Western印迹分别检测各个时间点nephrin、podocin、CD2相关蛋白(AP)、d辅肌动蛋白(actinin)-4的分布、mRNA和蛋白表达量的变化.应用免疫沉淀检测nephrin与podocin、nephrin与CD2AP分子间作用以及nephrin磷酸化水平.结果与对照组相比,第14天时肾病组尿蛋白显著增加(P＜0.01).与肾病组相比,利生普利、泼尼松和ATRA干预后均显著降低了蛋白尿(P＜0.05),减轻了足突融合.通过分析不同时间点足细胞分子的表达,显示3种干预药物均引起了nephrin、podocin、CD2AP表达的变化,维持了正常的nephrin磷酸化水平,而且利生普利和泼尼松首先抑制了podocin分子,而ATRA首先抑制了CD2AP分子的异常变化.与此同时,nephrin、podocin、CD2AP和α-actinin-4分子的分布在干预后也趋于正常.此外,无论在肾病组还是干预组大鼠,nephrin与podocin、nephrin与CD2AP分子间一直保持着共沉淀关系.结论利生普利、泼尼松和ATRA都通过稳定重要的足细胞分子nephrin、podocin、CD2AP来发挥它们的抗蛋白尿作用。
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