迁移侵袭抑制蛋白 MIIP 基因 K167E 位点突变体的构建和表达

来源 :宁夏医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lijincai0122

【摘要】

：

目的构建人迁移侵袭抑制蛋白（MIIP）蛋白K167E突变体的原核表达载体pGEX-4T-1-MIIP（K167E）并进行表达和纯化，为MIIP的后续功能研究提供有效工具。方法以pGEX-4T-1-MIIP重组质粒为模

【作者】

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高玉婧马晓东芦晓红姚青裴秀英杨怡李建宁张茜孙

【机构】

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宁夏医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系,宁夏人民医院,宁夏医科大学基础医学院

【出处】

：

宁夏医学杂志

【发表日期】

：

2014年1期

【关键词】

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pGEX-4T-1-MIIP GST—MIIP 突变原核表达融合蛋白 pGEX-4T- 1 - MIIP GST- MII P Mutation Proka

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（81101601）,宁夏自然科学基金资助项目（NZ11125）

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目的构建人迁移侵袭抑制蛋白（MIIP）蛋白K167E突变体的原核表达载体pGEX-4T-1-MIIP（K167E）并进行表达和纯化，为MIIP的后续功能研究提供有效工具。方法以pGEX-4T-1-MIIP重组质粒为模板，PCR扩增得到人MIIP基因（K167E）突变体的eDNA全长，将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-1，构建获得pGEX-4T-1-MIIP（K167E）突变体，经酶切鉴定及测序验证完全正确后，将其转化至大肠杆菌B121细胞中诱导表达，纯化获得GST—MIIP（K167E）融合蛋白。结果

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