【摘 要】
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目的比较3种细胞内活性氧(ROS)的检测方法,分析优缺点,筛选1种合适、准确的检测大鼠心肌细胞H9C2缺氧/复氧(H/R)模型中细胞内活性氧的方法。方法培养H9C2细胞,选择密度合适(8
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目的比较3种细胞内活性氧(ROS)的检测方法,分析优缺点,筛选1种合适、准确的检测大鼠心肌细胞H9C2缺氧/复氧(H/R)模型中细胞内活性氧的方法。方法培养H9C2细胞,选择密度合适(80%~90%)的H9C2细胞进行铺板,加入2,7-双乙酸二氯荧光素(DCFH-DA)荧光探针孵育,应用荧光显微镜、流式细胞仪及荧光酶标仪3种方法检测对照组(正常含氧量培养条件,CON)和实验组(缺氧复氧处理,H/R6h)心肌细胞的荧光强度,从而反映大鼠心肌细胞内活性氧水平,并利用数据分析软件进行统计分析。结果流式细胞仪检测分析结果:对照组(152 690±34 104)FU/μg,实验组(325 669±12 755)FU/μg;荧光酶标仪检测分析结果:对照组(282.3±12.57)FU/μg,实验组(1 274±37.05)FU/μg。实验组的ROS水平与对照组的ROS水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),实验组高于对照组,而荧光显微镜观察法无法定量地分析出实验结果。结论 3种ROS检测方法中,荧光酶标仪检测方法能更好地判断大鼠心肌细胞H9C2活性氧水平。
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