实时荧光定量PCR检测PrP基因表达标准品质粒和标准曲线的构建

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hwwacm

【摘要】

：

对金黄地鼠PrP基因序列进行分析,选择其高度保守区域设计引物,对金黄地鼠各组织提取mRNA,经RTPCR扩增,产物纯化后与pGEM-T-easy连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选后得到重组标准品

【作者】

：

宁章勇赵德明杨建民崔亚利孟丽平吴长德秦秀慧马李

【机构】

：

中国农业大学

【出处】

：

中国兽医学报

【发表日期】

：

2005年6期

【关键词】

：

实时荧光定量PCR PrP基因标准曲线重组质粒动物传染性海绵状脑病 real-time fluorescent quantitative PCR PrP

【基金项目】

：

中国科学院资助项目，高等学校博士学科点专项科研项目

下载到本地 , 更方便阅读

下载此文赞助VIP

声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架

论文部分内容阅读

对金黄地鼠PrP基因序列进行分析,选择其高度保守区域设计引物,对金黄地鼠各组织提取mRNA,经RTPCR扩增,产物纯化后与pGEM-T-easy连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选后得到重组标准品质粒,对重组标准品质粒进行酶切、PCR和测序鉴定,表明PrP基因保守区段已经成功克隆.将107～102拷贝/反应的重组标准品质粒进行荧光定量PCR,10次重复Ct值平均分别为17.50±0.5、21.38±0.2、25.29±0.7、29.12±0.7、31.34±0

其他文献

胃底腺癌伴胸膜壁层髓性脂肪瘤一例

患者男,54岁。无诱因间歇性上腹疼痛8个月,明显消瘦3个月,体重下降8 kg,于2005年4月14日收入院。纤维电子胃镜检查:胃底有一个4 cm×3 cm大小的不规则形溃疡,被覆污苔,质脆,

期刊

髓性脂肪瘤肾上腺胃近端癌胃底腺

儿科呼吸道感染临床药物治疗效果分析

目的：对儿科呼吸道感染的临床治疗效果进行分析。方法：选取90例儿科呼吸道患者为分析对象,将患者平均分为两组,每组45例患者,对照组给予常规抗感染及常规治疗,治疗组在给予抗病

期刊

儿科呼吸道感染临床治疗效果分析

牛BLG基因5’调控序列控制GFP基因在原代乳腺上皮细胞中的表达

采用胶原酶分阶段消化法对家兔的原代乳腺上皮细胞进行了分离培养,并且构建了以牛β-乳球蛋白(BLG)基因5′调控序列为启动子、以绿色荧光蛋白(GFP)基因为报告基因的真核表达

期刊

牛BLG基因原代乳腺上皮细胞诱导表达GFPBLGprimary mammary epithelial cellsGFP report geneind

初中分层走班教学的“分层”问题研究

百年大计,教育为先。新课程理念下的素质教育要求面向全体学生,关注学生的全面发展。新高考改革的“3+3”模式,也给了学生充分的自主选择权。新时代背景下,教育更注重学生的个体差异性和主体性地位。分层走班教学是“分层教学”和“选课走班制教学”的有机结合,是学生根据自身条件自主选择分层学科层次的教学模式,是新时代教育理念的具体体现。近年来,分层走班教学逐渐得到认识和接受,有的地区开始了分层走班教学实践。但

学位

分层走班教学学生分层分层策略分层走班课表分层教学目标

狐化脓性子宫内膜炎菌苗株的选育及免疫试验

通过血清分型证实，狐化脓性子宫内膜炎主要由Ⅲ、Ⅵ型绿脓杆菌所引起。地分离菌株进行毒力和免疫原性测定，筛选出了免疫原性良好的型代表株Ｐ９６０１和Ｐ９７０３。用选育菌株研制出的双价灭活疫苗

期刊

狐化脓性子宫内膜炎绿脓杆菌选育双价灭活苗fox purulent uterine mucositis Pseudomonas aeruginosa v

材料生命周期评价的水资源耗竭（火用）表征模型研究及其应用

材料作为社会文明进步的标志,推动着人类社会经济的发展同时,又是资源、能源消耗和污染排放大户,随着资源短缺和环境问题的日益严峻,材料与环境如何协调发展越来越受到人们的

学位

生命周期评价（火用）水资源耗竭钢铁混凝土道路

梯形综采工作面边采边延车接架技术

现代化煤矿开采过程中,在复杂地质条件下为多回收煤炭资源,工作面越来越长,因此需要在回采过程中延运输机对接支架,确保工作面的连续生产。