【摘 要】
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采用胶原酶分阶段消化法对家兔的原代乳腺上皮细胞进行了分离培养,并且构建了以牛β-乳球蛋白(BLG)基因5′调控序列为启动子、以绿色荧光蛋白(GFP)基因为报告基因的真核表达
【机 构】
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首都医科大学实验中心,中国农业大学
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采用胶原酶分阶段消化法对家兔的原代乳腺上皮细胞进行了分离培养,并且构建了以牛β-乳球蛋白(BLG)基因5′调控序列为启动子、以绿色荧光蛋白(GFP)基因为报告基因的真核表达载体.将该载体转染兔原代乳腺上皮细胞,然后用不同质量浓度的皮质醇、胰岛素和催乳素诱导.结果表明,用5 mg/L催乳素+5 mg/L胰岛素+1 mg/L皮质醇诱导,在诱导36 h后开始有荧光出现,诱导48～60 h时荧光更强一些,而未经诱导的细胞GFP则不表达.
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