军团菌16SrRNA聚合酶链反应方法的建立及应用

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建立了16SrRNA基因检测军团菌的多聚酶链反应方法。扩增参考菌株染色体DNA(L.Pneumophila1~14、L.bozemanni、L.dumofi、L.longbeachae、L.micdadei、L.jordanis),均可检出出386bp的基因片段,敏感性为103cfu/ml(平均值);而扩增9株非军团菌均为阴性。对模拟血标本的检测,其敏感性可达102cfu/ml。应用本检测系统检测了24例临床标本,包括19份血、5份胸水,阳性率为70.8%(17/24)。与血清学检测和临床诊断治疗结果相符合。上述结果表明该方法敏感、特异、快速、简便。 A 16S rRNA gene was established for the detection of Legionella by polymerase chain reaction. A 386bp gene fragment was amplified with the reference strain chromosomal DNA (L. pneumophila1-14, L. bozemanni, L.dumofi, L. longbeachae, L.micadensis, L.jordanis) with a sensitivity of103cfu / ml (Average), while 9 non-Legionella strains were negative. The simulation of blood tests, the sensitivity of up to 102cfu / ml. Twenty-four clinical specimens, including 19 blood samples and 5 pleural effusions, were detected by this detection system. The positive rate was 70.8% (17/24). Consistent with the results of serological tests and clinical diagnosis. The above results show that the method is sensitive, specific, rapid and easy.
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