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目的
研究Ki-67基因在人类正常和异常细胞的mRNA转录和翻译,了解其在肿瘤细胞增殖中的作用。
方法以PCR扩增Ki-67基因的exon13、codon2的cDNA片段(435bp),地高辛标记转录合成mRNA探针,原位杂交结合免疫组化分析Ki-67基因的第13外显子(exon13)在Hela细胞、结肠癌细胞、扁桃体和胰腺癌石蜡切片中的转录及翻译。
结果应用地高辛标记的mRNA原位杂交技术可成功地在Hela细胞、结肠癌细胞、扁桃体和胰腺癌的石蜡切片检测到Ki-67mRNA信号,结肠癌和胰腺癌细胞均存在Ki-67基因的exon13 mRNA的过度转录。
结论结肠癌和胰腺癌Ki-67基因的exon13的过度转录,提示该基因表达异常,尤其是exon13,在恶性肿瘤的发生和发展中可能起一定作用。