【摘 要】
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目的：探讨血小板反应蛋白4（thrombospondin-4,TSP-4）对高糖（high glucose,HG）刺激足细胞增殖、凋亡、氧化应激及炎症反应的潜在影响，揭示TSP-4在糖尿病肾脏病（diabetic kidney disease,DKD）发生发展中的作用。方法：（1）通过实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测HG诱导的足细胞中TSP-4和信号转导因子和转录激活因子3（signal
【基金项目】
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常州市卫生健康青苗人才培养工程项目（CZQM2020056）；
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目的：探讨血小板反应蛋白4（thrombospondin-4,TSP-4）对高糖（high glucose,HG）刺激足细胞增殖、凋亡、氧化应激及炎症反应的潜在影响，揭示TSP-4在糖尿病肾脏病（diabetic kidney disease,DKD）发生发展中的作用。方法：（1）通过实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测HG诱导的足细胞中TSP-4和信号转导因子和转录激活因子3（signal transducer and activator of transcription3,STAT3）的表达水平；（2）在HG诱导的足细胞中干扰TSP-4后，通过细胞计数试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）和5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷（5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU）测定增殖能力；通过流式细胞术测定足细胞的凋亡和细胞周期分布；使用试剂盒检测活性氧（reactive oxygen species,ROS）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和过氧化氢酶（catalase,CAT）的相对含量。此外，通过酶联免疫吸附法检测炎症因子白细胞介素（interleukin,IL）-1β、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α和IL-6的表达水平；（3）应用染色质免疫共沉淀（chromatin immunoprecipitation,ChIP）验证转录因子STAT3与TSP-4的启动子区域的关系，并通过双荧光素酶报告基因检测进一步验证。结果：（1）TSP-4和p-STAT3在HG诱导的足细胞中呈时间依赖性上调（P ＜0.05）；（2）干扰TSP-4可以逆转HG诱导的足细胞凋亡、氧化应激、炎症反应和受抑制的增殖（P ＜0.05）；（3）STAT3可以结合TSP-4的启动子区域，从而诱导转录，对TSP-4启动子活性具有正向调控作用。结论：干扰TSP-4可减轻HG诱导的足细胞凋亡、氧化应激和炎症反应，对足细胞具有保护作用；转录因子STAT3对TSP-4基因启动子活性具有正向调控作用。
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