酿酒酵母培养物对内毒素诱导的鹅肠上皮细胞炎性损伤的缓解作用

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本试验旨在研究酿酒酵母培养物(YC)对内毒素(LPS)诱导的原代鹅肠上皮细胞炎性损伤的缓解作用。试验利用混合酶消化法成功获得原代鹅肠上皮细胞,通过1μmol/L LPS处理建立肠上皮细胞炎性损伤模型;并分别选取浓度为100、300和500 mg/L的YC溶液预处理细胞,分析YC对LPS诱发的炎性损伤的缓解作用。试验采用CCK-8法测定细胞活性,实时荧光定量PCR检测炎性因子及核转录因子-κB(NF-κB)信号通路基因表达,荧光探针法分析细胞活性氧(ROS)浓度,并通过测定抗氧化酶活性评价细胞氧化应激状态。结果表明:1μmol/L LPS可诱导肠上皮细胞白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)基因相对表达量显著上调(P<0.05),同时显著或极显著上调Toll样受体2A(TLR2A)(P<0.01)、Toll样受体4(TLR4)(P<0.01)、髓样分化因子88(MyD88)(P<0.05)、NF-κB(P<0.01)等NF-κB信号通路基因相对表达量;而使用300和500 mg/L浓度的YC预处理可抑制LPS诱导的炎症反应,减少ROS生成。同时,300 mg/L的YC预处理还可显著缓解LPS引起的细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性下降(P<0.05),降低细胞丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量(P<0.05)。由此可见,YC可调节鹅肠上皮免疫平衡,缓解炎性损伤,还可通过提高肠上皮细胞对氧自由基的清除能力及抗氧化能力,保护肠上皮细胞的正常功能。
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