论文部分内容阅读
目的:探究前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)及其受体前列腺素E2受体(E-prostanoid2 receptor,EP2R)在链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠视网膜病变中的作用及机制.方法:将SD大鼠随机分为6组:对照组使用标准饲料喂养;其他组大鼠使用高脂高糖饲料喂养+腹膜内注射链脲佐菌素(30 mg/kg)建立糖尿病大鼠模型;PGE2组、Butaprost组、AH6809组大鼠分别给予玻璃体腔内注射5 mmol/L的PGE2、EP2R激动剂Butaprost或EP2R抑制剂AH6809,注射剂量为6 μL.DMSO组注射等剂量DMSO盐溶液.每周注射1次,共注射4周.通过苏木精伊红(HE)染色评价视网膜病变;免疫组化或蛋白质印迹分析视网膜组织中EP2R、胰岛素受体底物l (IRS-I)、磷酸肌醇3激酶(PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、内皮一氧化氮合酶(eNOS)、核因子κB p65 (NF-κB p65)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达.此外,分别应用PGE2、Butaprost或AH6809处理高糖培养基(4.5 g/L葡萄糖)培养的视网膜微血管内皮细胞系(HRMEC),并检测各组细胞活力、细胞凋亡率和血管生成情况.结果:与正常视网膜组织相比,糖尿病大鼠视网膜组织中EP2R呈显著高表达(P＜0.05).与对照组和模型组相比,PGE2和Butaprost组的EP2R、IRS-1、p-PI3K、p-Akt、ICAM-1、eNOS、NF-KBp65和VEGF的表达水平显著升高,而AH6809组的上述蛋白的表达水平显著降低(P＜o.05).体外研究中,与对照组和模型组HRMEC相比,PGE2和Butaprost处理的HRMEC的活力和血管生成数量显著升高,而细胞凋亡率显著降低,AH6809处理则抑制了上述细胞改变(P＜0.05).结论:PGE2/EP2R可能通过促进IRS-1/PI3K/Akt信号通路介导的炎症反应、细胞凋亡和血管生成促进糖尿病视网膜病变的发生和发展.