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目的
探讨体外培养星形胶质细胞缺氧再给氧后热休克蛋白70(HSP70)表达的变化特点及其所起的作用。
方法取生后1~2d的新生昆明小鼠大脑皮层进行星形胶质细胞纯培养,培养2周左右进行缺氧实验。缺氧时间分别为0、3、6、12、24、48 h,并取缺氧24 h后再给氧0、3、6、12、24、48 h的星形胶质细胞进行细胞免疫组化、原位杂交,观察HSP70表达的变化。
结果原位杂交显示缺氧3 h即有HSF70 mRNA的表达,6 h达高峰,12 h仍较明显,24 h后逐渐下降,48 h表达显著降低,但仍高于对照组(即缺氧0小时组)。而用免疫组化方法在缺氧后仅能检出少量阳性的HSP70核蛋白。缺氧24 h后再给氧也有HSP70 mRNA的表达,于再给氧6 h达高峰,12 h逐渐下降,同时免疫组化可见应激蛋白HSP70的检出,为核内表达,于再给氧12 h达高峰。
结论缺氧可引起HSP70 mRNA的表达增强,直至随后再给氧时才有应激蛋白HSP70的合成,HSP70可能对于星形胶质细胞缺氧再给氧引起的损伤具有保护作用。