【摘 要】
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用蔗糖密度梯度离心法分离纯化白斑综合症病毒(WSSV).设计并合成引物,提取WSSV中国株的基因组DNA作为模板,通过PCR,扩增克隆出VP28基因,利用BamHI和EcoRI切点将VP28基因插入
【机 构】
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中国科学院海洋研究所,中国科学院植物研究所,中国水产科学研究院黄海水产研究所,中国科学院海洋研究所
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用蔗糖密度梯度离心法分离纯化白斑综合症病毒(WSSV).设计并合成引物,提取WSSV中国株的基因组DNA作为模板,通过PCR,扩增克隆出VP28基因,利用BamHI和EcoRI切点将VP28基因插入克隆载体pUC19的多克隆位点上,得到VP28基因的重组克隆质粒,对其进行双向DNA测序.测序结果表明,该基因含有615个核苷酸,与GenBank中已有不同来源的WSSV的序列片段同源性为100%.利用BamHI切点将VP28的基因插入到穿梭表达载体启动子PpsbA的下游,EcoRI酶切鉴定,得到正向连接的可在
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